HEPES es ácido ethanesulfonic de la piperacina hidroxietílica 4 en chino, número de CAS es 7365-45-9, gama de almacenador intermediario del pH es 6.8-8.2, valor del pKa es 7,5 en el ℃ 25. El Na de HEPES es n - la piperacina-n (2-hydroxyethyl) ‘- (2-ethanesulfonic ácido) la sal del sodio, su número de CAS es 75277-39-3. El Na de HEPES y de HEPES es los almacenadores intermediarios biológicos muy importantes, que son ampliamente utilizados en biopharmaceutical, diagnóstico médico y otros campos.
Empaquetado de los productos biológicos de la serie del almacenador intermediario
HEPES es una clase de almacenador intermediario anfótero, que se utiliza en medio del cultivo celular y la investigación de la proteína para los diversos tipos de organismos. Puede también ser utilizado en equipo de diagnóstico bioquímico del equipo, de la extracción de la DNA/del ARN y equipo de diagnóstico de la polimerización en cadena. Debido a su efecto no tóxico sobre las células y la capacidad de controlar la gama constante del pH durante mucho tiempo, HEPES es de uso frecuente como añadido cosmético, agente activo, pelando el agente y al promotor con el papel del agente.
Diferencia entre el Na de HEPES y de HEPES: El Na de HEPES, también conocido como base orgánica de HEPES, es una relación conjugada de la ácido-base con HEPES. Son esencialmente lo mismo, pero el pH de las dos sustancias después de que la disolución sea diferente.
Los métodos de la preparación de HEPES estaban como sigue
Sobre la preparación de la solución tampón de HEPES, según el uso de la preparación, uno es puro HEPES + NaOH, el otro es HEPES + sal. Se resumen los diversos métodos de la preparación como sigue:
1 preparación del、 de 500 ml 1 m HEPES, pH = 7,0, solución común
Disuelva 119,15 g HEPES en el agua destilada 400ml, añada 0,5 ~ solución acuosa del NaOH del 1m para ajustar por lo menos el pH requerido (la gama eficaz del pH de HEPES es 6,8 ~ 8,2), después fija el volumen a 500ml con agua destilada y la tienda en el ℃ 4.
2 fórmula del almacenador intermediario del、 HEPES con la pequeña cantidad de la sal (500ml)
HEPES 6.5g, NaCl 8.0g, na2hpo4.7h2o 0.198g, ajustan el valor de pH con la solución del NaOH de los 0.5m, y finalmente fijan el volumen.
preparación de 3、 2 de la solución de sal del almacenador intermediario del × HEPES
Disuelva el KCl NaCl 1.6g, 0.074g, el dextrano 0.027g na2hpo4.2h2o, 0.2g y 1g HEPES en el agua destilada 90ml, ajuste al valor de pH requerido con el NaOH de los 0.5m, y después fije el volumen a 100ml con agua destilada.
El método de la preparación de Na de HEPES estaba como sigue
El Na de HEPES se puede sintetizar por 4 sulfonato hidroxietílico del vinilo de la piperacina y del sodio, o por la síntesis de alta presión del ácido sulfónico hidroxietílico, del hidróxido de sodio y de la piperacina hidroxietílica 4. Actualmente, el método más ampliamente utilizado de la preparación que cumple los requisitos de almacenadores intermediarios biológicos es la reacción de HEPES con el NaOH para producir el Na de HEPES. Los pasos específicos de la preparación son como sigue:
Bajo la protección del nitrógeno, HEPES con pureza entre 90-99% y el NaOH sólido o la solución fueron reaccionados para 0.2-1 horas en el ℃ 20-100. Después de la reacción, el producto obtenido fue decolorado, filtrado, concentrado, deshidratado, cristalizado, lavado y secado para obtener el Na de HEPES.
Este método es simple y fácil actuar, y la producción y la pureza del producto del Na de HEPES son altas, que puede cumplir los requisitos de la pureza del almacenador intermediario biológico.
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