Se debe prestar atención al uso de HEPES: ajustar el pH según la temperatura experimental, controlar la concentración, evitar la luz y el envasado para prevenir la descomposición, evitar altas concentraciones o ciclos repetidos de congelación-descongelación, filtrar y esterilizar después de la preparación, realizar operaciones asépticas estrictamente y llevar a cabo una verificación previa del experimento de compatibilidad para asegurar la precisión experimental.