Especificación para el uso de sustrato cromogénico DAOS 83777-30-4: Los detalles determinan la exactitud de la detección

En el campo del diagnóstico in vitro (DIV), los sustratos cromogénicos sirven como reactivos clave para las reacciones enzimáticas,y su rendimiento afecta directamente a la sensibilidad y exactitud de los resultados de detección. N-Etil-N - (2-hidroxi-3-sulfopropilo) -3,5-dimetoxianilina sal de sodio (Reactivo DAOS), como un nuevo sustrato de peroxidasa, es ampliamente utilizado en pruebas bioquímicas clínicas debido a su alta sensibilidad y baja interferencia de fondo.Los requisitos estrictos para los detalles operativos durante su uso a menudo se convierten en un factor clave que determina la precisión de la detecciónEste artículo analizará las especificaciones centrales utilizadas en DAOS desde cuatro dimensiones: disolución, almacenamiento, optimización del sistema de reacción y control de calidad.

1,Disolver: formulado con precisión para evitar la pérdida de actividad

DAOS es un reactivo sólido en polvo, y su disolución debe seguir estrictamente los principios de "baja temperatura, evitar la luz y agitar lentamente".el medio de disolución debe ser una solución tampón de fosfato con un pH de 5.5-7.0 para evitar daños en la estructura del sustrato causados por ambientes ácidos o alcalinos.el proceso de disolución debe llevarse a cabo en un baño de hielo para evitar el sobrecalentamiento local y la degradaciónCuando se remeja, se debe utilizar un agitador magnético para controlar la velocidad y evitar la generación de burbujas debido a la agitación violenta, que puede causar la oxidación de los ingredientes activos.debe filtrarse a través de una membrana filtrante para eliminar las impurezas insolubles y evitar que se produzcan valores de absorbancia no específicos en reacciones posteriores..

Polvo de DAOS

2,Almacenamiento: Envase y evitar la luz, prolongar la vida útil

La estabilidad de la solución DAOS se ve significativamente afectada por la luz, la temperatura y el oxígeno.El polvo no utilizado debe sellarse y almacenarse en un ambiente a baja temperatura para evitar la agrupación causada por ciclos de congelación- descongelación repetidos.La solución DAOS disuelta debe dividirse en frascos marrones opacos según la cantidad de uso único, con una capacidad no superior a 5 ml por frasco, para reducir el número de aberturas del frasco.Se recomienda controlar la temperatura de almacenamiento entre 2-8 °C y utilizarla lo antes posible.Si el color de la solución cambia de incoloro a amarillo claro o aparece precipitación, indica que el sustrato se ha oxidado y es ineficaz.y necesita ser reemplazado inmediatamente.Cuando se almacena durante mucho tiempo, se pueden añadir antioxidantes adecuados, pero su impacto en el sistema de detección debe verificarse mediante experimentos previos.

3,Sistema de reacción: Optimización de parámetros, equilibrio de sensibilidad y especificidad

La eficiencia de reacción entre DAOS y peroxidasas (como la peroxidasa del rábano picante, HRP) está influenciada por tres factores: pH, temperatura y concentración del sustrato.se recomienda utilizar un sistema tampón con un pH de 6.0 a 7.0, donde la actividad enzimática y la solubilidad del sustrato alcanzan el equilibrio óptimo.El control de la temperatura deberá seguir estrictamente las instrucciones del reactivo para evitar las fluctuaciones de temperatura que puedan provocar una deriva en los valores de absorción.En cuanto a la concentración de DAOS, se recomienda determinar la dosis óptima mediante titulación del tablero de ajedrez.Mientras que si es demasiado bajo, reducirá la sensibilidad de detección.

4,Control de calidad: seguimiento completo del proceso para garantizar la trazabilidad de los resultados

Para garantizar la exactitud de la detección, es necesario establecer un sistema completo de control de calidad del proceso, desde la preparación del reactivo hasta el análisis de los resultados.El proceso de preparación requiere registrar el tiempo de disoluciónEl 10% de cada lote de fluido de trabajo debe conservarse como muestra para el ensayo de nuevo.El proceso de reacción requiere el establecimiento de controles en blanco (excluyendo enzimas) y controles positivos (normas de concentración conocidas), y la verificación de la eficacia de la reacción mediante la tasa de cambio de los valores de absorción.

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