Aplicación del amortiguador biológico CAPS 1135-40-6 en el kit de diagnóstico por PCR

Las propiedades químicas del CAPS: el "punto de equilibrio dorado" para el amortiguamiento de bases débiles

CAPS es un amortiguador zwitteriónico con un valor de pKa de 10,4 (25 °C), que presenta una excelente capacidad de amortiguamiento en ambientes alcalinos.el rango de amortiguación de CAPS (pH 9),.7-11.0) está más en consonancia con los requisitos de ciertos sistemas especiales en las reacciones de PCR. El grupo ciclohexilamina en la estructura molecular del amortiguador CAPS le confiere una buena hidrofobía,mientras que el grupo del ácido sulfónico asegura la solubilidad en aguaEsta característica "flexible y rígida" permite a CAPS mantener la estabilidad del pH de la solución al tiempo que reduce la interferencia no específica con la actividad enzimática.proporcionando un entorno suave y estable para las reacciones de PCR.

Caps en polvo

El papel central de los CAPS en la PCR

1La estabilidad del pH asegura la actividad enzimática:CAPS regula con precisión el valor del pH del sistema de reacción para evitar la desviación del pH causada por la evaporación de la solución o la degradación química durante las etapas de desnaturación a alta temperatura, lo que garantiza que la enzima catalice la síntesis de ADN en condiciones óptimas y mejora significativamente la eficiencia de la amplificación.

2- Inhibición de la unión no específica y mejora de la especificidad: CAPS mantiene la resistencia iónica estable, reduce la probabilidad de desajuste de la plantilla del primer,y su estructura química única puede reducir la tensión superficial de la solución, optimizar la formación de gotas y reducir aún más el ruido de fondo en la detección de alta precisión como la PCR.

3Compatible con muestras complejas y mayor capacidad antiinterferente: Las muestras clínicas (como la sangre y la saliva) a menudo contienen inhibidores que pueden interferir con las reacciones de PCR.El sistema tampón de CAPS puede neutralizar el efecto de carga de algunos inhibidores, combinado con el efecto de desnaturación de su entorno alcalino en ciertos inhibidores de proteínas, mejorando significativamente la adaptabilidad del kit a muestras complejas.

Casos prácticos de aplicación del CAPS: validación extensa desde el laboratorio hasta el ámbito clínico

En la detección de ácidos nucleicos de COVID-19, CAPS ha sido incluido en la fórmula del kit de PCR por varias organizaciones autorizadas.un kit de reactivo de cierta marca que utilizaba el sistema de amortiguación CAPS mostró una mayor sensibilidad en los ensayos comparativos y pudo mantener la estabilidad del pH en condiciones de alta temperaturaAdemás, en escenarios como la detección de mutaciones de enfermedades genéticas y el análisis de marcadores tumorales, se puede utilizar un método de detección de la mutación de la enfermedad genética.el ambiente alcalino débil de CAPS puede optimizar la eficiencia de unión de la sonda, mejoran la intensidad de la señal de fluorescencia y proporcionan apoyo para la detección de objetivos de baja abundancia.

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