Explorando los misterios del biobúffer de alta pureza HEPES CAS 7365-45-9

La lactato deshidrogenasa (LDH), como una de las enzimas clave en la vía de glucólisis intracelular, sufre cambios en su actividad en diversas condiciones patológicas.La medición precisa de la actividad de la LDH no sólo es de gran importancia para la investigación científica básicaLa elección del amortiguador adecuado es uno de los factores clave para garantizar la exactitud de los resultados de las pruebas durante este proceso.

Ácido hidroxietil piperazino etanosulfónico (El buffer HEPES), como amortiguador biológico ampliamente utilizado, se está convirtiendo gradualmente en el componente central de los kits de detección de lactato deshidrogenasa.Este artículo analizará en detalle el papel clave del HEPES en la detección de la lactato deshidrogenasa desde múltiples perspectivas, incluida su importancia y aplicación en la detección de LDH.

HEPES en polvo

La importancia del HEPES en la detección de la lactato deshidrogenasa

La reacción redox entre lactato y piruvato catalizada por LDH requiere un rango de pH específico para mostrar una actividad óptima.la actividad de la enzima puede disminuir o incluso desaparecer por completoPor lo tanto, la adición de agentes amortiguadores al sistema de detección de lactato deshidrogenasa es un paso clave para garantizar la precisión de la detección.

El HEPES desempeña un papel crucial en los kits de detección de lactato deshidrogenasa debido a su excelente rendimiento de amortiguación.Esta es una reacción reversible., y cuando la concentración de ácido láctico es alta, promueve la reacción inversa, es decir, la síntesis de ácido pirúvico a partir de ácido láctico.,El ácido L-láctico reacciona con NAD+ para producir ácido pirúvico y NADH.lo que significa que la actividad de la LDH puede cuantificarse mediante el seguimiento de los cambios en la absorciónPor lo tanto, HEPES no sólo mantiene la estabilidad del pH del sistema de reacción, sino que también proporciona una garantía para la determinación precisa del contenido de lactato deshidrogenasa.

Aplicación de HEPES en el kit de detección de lactato deshidrogenasa

El kit de reactivos utilizado para la detección de la lactato deshidrogenasa consiste generalmente en reactivos independientes I y II.

En el reactivo I, el HEPES actúa como amortiguador biológico y forma un sistema de reacción con complejos de iones metálicos, sustratos de LDH, tensioactivos, activadores de enzimas LDH, conservantes y agua.El HEPES es responsable principalmente de mantener la estabilidad del pH del sistema de reacción y de proporcionar un ambiente de reacción adecuado para el sustrato de lactato deshidrogenasa.Al mismo tiempo, interactúa con los complejos de iones metálicos para asegurar que los iones metálicos (como los iones de zinc en la lactato deshidrogenasa) estén en un estado químico estable,mantener la conformación activa de la enzimaAdemás, los tensioactivos, activadores enzimáticos y otros componentes pueden promover mejor las reacciones en el ambiente de pH estable creado por HEPES.

En el reactivo II, el HEPES también existe y funciona junto con el estado de oxidación del nicotinamida adenina dinucleótido (NAD +), tensioactivos, conservantes y agua.como coenzima en reacciones catalizadas por la lactato deshidrogenasa, es muy sensible al pH en las reacciones redox en las que participa.El HEPES puede garantizar que el NAD + se sinergice con la lactato deshidrogenasa en condiciones de pH adecuadas para completar el proceso de redox del sustrato.Además, HEPES también trabaja junto con conservantes para mantener la estabilidad del reactivo II y extender la vida útil del kit de reactivos.

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