Selección de la concentración del tampón HEPES 7365-45-9 en cultivo celular

El mantenimiento de un valor de pH estable durante el cultivo celular es uno de los factores clave para garantizar un crecimiento y proliferación celulares saludables.El buffer HEPESEl ácido acetilsalicílico (ASA) se utiliza ampliamente en el campo del cultivo celular como un importante amortiguador de iones de hidrógeno debido a su capacidad para proporcionar efectos amortiguadores estables en un amplio rango de pH (6,8 a 8,2).Este artículo explorará en detalle la selección de la concentración de HEPES en cultivos celulares, con el objetivo de proporcionar orientación práctica a los investigadores.
 

 
Aplicación del HEPES en cultivos celulares
 
La función principal del HEPES en cultivo celular es mantener la estabilidad del pH del medio de cultivo.la entrada de dióxido de carbono desde el aire en el frasco de cultivo puede provocar un aumento del valor del pH del medio de cultivoLa adición de HEPES puede prevenir eficazmente este fenómeno y mantener el pH dentro de un rango apropiado.

 

 
HEPES en polvo
 
Determinar la concentración adecuada de HEPES
 
1Diferencias en la línea celular
 
Hay diferencias en la demanda de concentración de HEPES entre las diferentes líneas celulares.puede ser necesario determinar la concentración óptima mediante experimentos de gradiente de concentraciónEs posible establecer un gradiente de concentración de 2 mM desde el rango convencional de 10 a 25 mM para observar el estado de crecimiento, la tasa de proliferación,y actividad metabólica de las células a diferentes concentraciones, con el fin de encontrar la concentración de HEPES más adecuada para la línea celular.
 
2La influencia de la composición del medio de cultivo
 
El HEPES interactúa con otros sistemas tampón en el medio de cultivo, como los sistemas tampón de bicarbonato.la cantidad óptima de HEPES añadida también puede variar en consecuenciaLa investigación ha demostrado que aumentar la concentración de HEPES a 30 mM mientras se reduce la concentración de bicarbonato puede mantener mejor la estabilidad del pH para el crecimiento celular y promover la proliferación celular.
 
3La influencia de la temperatura
 
La temperatura es un factor importante que afecta a la tasa metabólica de las células, que a su vez afecta a la demanda de pH de la célula.El HEPES puede ejercer un efecto amortiguador eficazSin embargo, para algunas células especiales, como ciertas células de insectos, su temperatura óptima de cultivo puede ser inferior.Como los cambios de temperatura pueden alterar la actividad enzimática y las vías metabólicas dentro de las células, lo que puede dar lugar a cambios en la tasa de producción de ácido o alcalino.
 
Métodos para mejorar el efecto amortiguador del HEPES
 
1. Optimizar la frecuencia de cambio de fluido
 
Los cambios frecuentes de fluidos pueden provocar que el HEPES se diluya antes de que su capacidad de amortiguación se utilice plenamente.Es crucial estudiar las tasas metabólicas de las diferentes líneas celulares y determinar la frecuencia adecuada de intercambio de líquidosPara las células con metabolismo lento, el intervalo entre los cambios de fluido puede ampliarse adecuadamente para garantizar el efecto amortiguador sostenido y estable del HEPES en el medio de cultivo.reducción del impacto de los cambios en el fluido en el entorno de crecimiento celular.
 
2. Reducir las pérdidas de HEPES
 
Durante el almacenamiento y uso del medio de cultivo, factores como la exposición a la luz y la alta temperatura pueden provocar la degradación del HEPES.se recomienda almacenar el medio de cultivo en frascos de vidrio marrón para evitar la influencia de la luz en el HEPESAl mismo tiempo, al configurar el medio de cultivo, debe seguirse el principio de utilizar y preparar en el lugar para reducir la pérdida de HEPES causada por el almacenamiento a largo plazo.garantizar que se mantenga una concentración efectiva durante todo el proceso de cultivo celular, y mejorar el efecto amortiguador.
 
 

Embalaje del producto
 
Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. se especializa en la producción de hepaes de alta calidad y otrosAgentes de amortiguación biológicosNuestro equipo técnico profesional asegura la calidad del producto y también puede proporcionar soluciones personalizadas a los problemas post-venta oportunos.Por favor haga clic en el sitio web oficial para obtener más detalles o contáctenme!