Cómo preparar la solución tampón de Hepes CAS 7365-45-9

Comprender la importancia de la solución tampón HEPES

El HEPES, como buen amortiguador de iones de hidrógeno, puede resistir eficazmente la influencia de factores externos (como el CO2,Los cambios de temperatura) sobre el valor del pH de las soluciones en diversas condiciones experimentales, tales como cultivo celularSu estructura química única le confiere una excelente capacidad de amortiguación, sin penetrar en el interior de las células,garantizar la estabilidad del entorno celular, por lo que es una opción ideal para el cultivo de células.

HEPES en polvo

Fase de preparación: Materiales y equipo

1. Materiales principales: polvo de HEPES (alta pureza, generalmente recomendada ≥ 99%), agua ultrapura (o agua desionizada), sales necesarias (como NaCl, KCl, etc.),añadido de acuerdo con las necesidades experimentales específicas), reguladores ácido-base (como NaOH, HCl).

2Equipo: balanza electrónica (con precisión de 0,1 mg), agitador magnético, medidor de pH, matraz volumétrico (elegir las especificaciones apropiadas según sea necesario), pipeta y cabeza de arma, cilindro de medición, etc.

Calculo y pesaje

1Calcular la cantidad requerida: En primer lugar, determinar el volumen total y el valor final del pH de la solución tampón requerida en función de los requisitos experimentales.Consulte la literatura o utilice herramientas en línea para calcular la masa requerida de HEPES en polvo y la proporción de otros componentes.

2- Pesado preciso: utilizar una balanza electrónica para pesar el polvo de HEPES calculado y otros componentes necesarios (como NaCl, etc.), teniendo cuidado de evitar la contaminación y la pérdida.

Disolver y ajustar el pH

1. Disolución preliminar: añadir lentamente el polvo de HEPES pesado y otras sales en agua ultrapura, y agitar bien con un agitador magnético hasta que se disuelva por completo.Tenga en cuenta que durante el proceso de disolución puede generarse calor., y la velocidad y el tiempo de agitación deben controlarse adecuadamente.

2. Ajuste del pH: Utilice un medidor de pH para controlar el valor del pH de la solución, y añada lentamente una cantidad adecuada de solución de NaOH o HCl para ajustar hasta alcanzar el valor de pH objetivo.Se requiere una agitación continua durante el proceso de ajuste para garantizar un valor de pH uniforme.

3. Recomprobar: una vez finalizado el ajuste, utilizar de nuevo el medidor de pH para confirmar el valor de pH de la solución y asegurarse de que es correcto.

Establecimiento y conservación de la capacidad

1Volumen constante: transferir la solución ajustada a un matraz volumétrico, diluir con agua ultrapura hasta el volumen deseado y seguir revolviendo uniformemente.

2Filtración: para eliminar posibles impurezas, la solución se puede filtrar a través de una membrana estéril.

3Almacenamiento: Transfiere la solución de amortiguador preparada de HEPES a un recipiente limpio, indicando la fecha de preparación, el valor del pH y la información del usuario, y guárdela en refrigerador a 4 °C.Tenga cuidado de evitar la congelación y descongelación repetidas para evitar afectar el efecto tampón.

Cuestiones que requieren atención

1Durante el proceso de preparación, se debe seguir estrictamente el principio de operación aséptica para evitar la contaminación.

2El polvo de HEPES es propenso a absorber humedad y debe sellarse para evitar la humedad durante el almacenamiento.

3La capacidad de ajuste del pH del polvo de HEPES de diferentes lotes puede variar ligeramente, por lo que el valor del pH debe volver a medirse y ajustarse cada vez que se prepara.

4El amortiguador HEPES preparado debe utilizarse lo antes posible, ya que el almacenamiento prolongado puede afectar su efecto amortiguador.
Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. ha estado investigando agentes de amortiguación biológicos como el amortiguador Hepes durante casi 20 años, con una rica experiencia en investigación y producción.Es un conocido fabricante de alta calidad en China..

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