¿Por qué los agentes reductores deben añadirse al tampón de Tris 150-25-4

En el campo de las ciencias biológicas, especialmente en el estudio de la química y la bioquímica de las proteínas, el mantenimiento de la estabilidad y la actividad de las proteínas es crucial.Como ejecutor principal de las actividades de la vida, la integridad de la estructura y función de la proteína tiene un impacto decisivo en varios procesos vitales dentro de las células.Las proteínas se ven afectadas fácilmente por diversos factores ambientalesEntre ellos, la oxidación es un factor importante que influye,que puede destruir la estructura y la función de las proteínas al oxidar residuos de aminoácidos como la cisteína.

El amortiguador de Tris

Para resolver este problema, los científicos suelen utilizar soluciones tampón que contienen agentes reductores, tales como:El amortiguador de TrisEl tampón Tris es ampliamente utilizado debido a su excelente capacidad de tampón y estabilidad,Pero el uso de Tris solo no es suficiente para proteger eficazmente las proteínas del daño oxidativo.Por lo tanto, la adición de agentes reductores se ha convertido en un paso importante.

Tres agentes reductores comunes en el tampón de Tris
 

1. Ditiotreito (DTT)

DTT es un agente reductor orgánico de moléculas pequeñas comúnmente utilizado, y la adición de DTT al tampón de Tris puede prevenir la oxidación de proteínas.es una molécula lineal que se transforma en una estructura cíclica hexagonal que contiene enlaces disulfuro después de la oxidaciónEn el experimento, la concentración de DTT suele ser de 5 a 10 mM para garantizar que la concentración del agente reductor sea mucho mayor que la concentración de proteína en el búfer.protegiendo así la proteína del daño oxidativo.

2. fosfina tri (2-carboxietil) (TCEP)

El TCEP es un agente reductor de tiol con amplias aplicaciones en la química de proteínas y la investigación de proteómica.pero tampoco necesita ser eliminado en ciertas reacciones de enlace cruzado de tiolosAdemás, el TCEP tiene una buena estabilidad, pero su precio es relativamente alto.

3. Mercaptoetanol (β-mercaptoetanol, BME)

El mercaptoetanol es un agente reductor de uso común que puede proteger a los grupos tiólicos libres en las proteínas de la oxidación, evitando así la agregación o desnaturalización de las proteínas.la capacidad reductora del mercaptoetanol es relativamente débilAdemás, debido a la volatilidad del mercaptoetanol, el consumo de mercaptoetanol es muy bajo.puede añadirse a la solución de la piscina y difundirse en gotas mediante su volatilización para proporcionar una reducción sostenida.

Embalaje del producto

Precauciones para el uso

El tampón de Tris se prepara generalmente a temperatura ambiente, pero los agentes reductores como el DTT y el mercaptoetanol se degradan fácilmente a temperatura ambiente.si se añaden estos agentes reductores al búferAdemás, se pueden añadir agentes reductores al amortiguador de Tris antes del experimento para garantizar buenos resultados.

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