CAS 5625-37-6 buenos TUBOS Piperazine-1,4-Diethanesulfonic de las soluciones tampón ácidos

Buen polvo cristalino blanco ácido CAS5625-37-6 el Purity>99% de los TUBOS Piperazine-1,4-Diethanesulfonic de las soluciones tampón

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El nombre completo de TUBOS es ácido de piperazine-1,4-diethanesulfonic, una sustancia que pueda mantener el pH de la solución dentro de cierta gama. Cuando una determinada cantidad de ácido y de álcali se añade a algunas soluciones, tiene el efecto de obstaculizar el cambio de pH de la solución, que se llama un almacenador intermediario biológico que protege. Tal solución se llama una solución tampón. Los TUBOS son un miembro importante del buen almacenador intermediario de s. El buen almacenador intermediario de s es un sistema del almacenador intermediario dedicado a la investigación de las ciencias de la vida, que no participa adentro y no interfiere con procesos bioquímicos.

Información básica

Estructura molecular

Uso de TUBOS

No puede formar complejos estables con la mayoría de los iones del metal y es conveniente para el almacenador intermediario en el sistema de la solución que contiene los iones del metal. Fue aplicado a la purificación del tubulin usando la cromatografía del fosfato de la celulosa. La proteína obligatoria recombinante purificada ARF1 y ARF2 de GTP fue purificada por la filtración de gel y utilizada como almacenador intermediario para cristalizar ketoenzyme de Escherichia Coli. Además, porque los TUBOS pueden formar radicales libres, no es conveniente para el sistema redox. La concentración baja de solución tampón de los TUBOS se debe utilizar en cromatografía del intercambio catiónico porque los TUBOS tienen fuerza iónica relativamente alta y su valor del pKa es dependiente de la concentración.

Ventaja de TUBOS

La pureza (el > 99%) es soluble en agua, el proceso es estable, y el aspecto del producto se puede garantizar para ser polvo cristalino blanco puro.

Los TUBOS ácidos diethanesulfonic de la piperacina tienen una variedad de sistemas del almacenador intermediario, entre los cuales el almacenador intermediario de la transformación de la solución tampón (también llamó la solución de la TB) se puede utilizar para preparar las células competentes muy eficientes.

El estado competente refiere a un estado fisiológico especial en qué células (o las bacterias) puede tomar las moléculas de la DNA del ambiente circundante y no son analizados fácilmente por los endonucleases de la restricción en la célula. Algunas bacterias son naturalmente competentes, por ejemplo bacillus subtilis, y algunas son artificial competentes, por ejemplo Escherichia Coli. Tratar las células receptoras con un método especial puede cambiar la permeabilidad de la membrana celular, haciéndole una célula competente que permita que las moléculas del portador con la DNA extranjera pasen a través.

Polvo crudo de los material-TUBOS de la solución competente de la TB

Preparación del almacenador intermediario de la transformación:

La transformación de células bacterianas competentes utiliza el método del cloruro de calcio. Escherichia Coli sacado en el nitrógeno líquido o el refrigerador a baja temperatura, raya en la placa de la libra, 37 grados durante la noche hasta una sola colonia crece. Escoja a una colonia con un diámetro de 1-3m m para inocular el medio del SOLLOZO en un frasco de 250ml/3L Erlenmeyer o frasco de 80ml/1L Erlenmeyer. Incube en 18 grados en 150-250RPM para 19-50h. Pare la cultura cuando el OD600 es cerca de 0.4-0.8, fresca 4 grados de agua helada por 10 minutos, centrifugadora en 300 RPM por 15 minutos, recupere las bacterias después de quitar el sobrenadante, suspenda en 1/3 volumen de solución helada de la TB, y centrifugúelas otra vez por 10 minutos para recuperar las bacterias. Suspenda con 1/12.5 volúmenes de TB, añada DMSO con una concentración final del 7%, y entonces fresco para 10 minutos en las partes alícuotas 0.1-1ml, y la tienda directamente en nitrógeno líquido o -80°C.

En la solución de la TB de Escherichia Coli suspendido, los componentes principales incluyen los TUBOS del almacenador intermediario y el cloruro de calcio para transformar las células en competente. Debe ser observado que este método es conveniente para las tensiones de Escherichia Coli que no contienen plásmidos, y no es conveniente para los plásmidos grandes. La eficacia de la transformación se puede reducir después del cryopreservation. Además, el OD600 óptimo de diversas tensiones bacterianas es también diferente, y necesita ser ajustado según diversos experimentos.

Hay muchos métodos para preparar las células competentes con la TB, y la eficacia de métodos diferentes puede ser diferente, y las tensiones o los tipos aplicables de la célula pueden también ser diferentes. Los TUBOS producidos por Desheng son un reactivo del polvo, y las soluciones competentes de la TB se pueden preparar según diversas necesidades.