CAS 5625-37-6 buenos TUBOS Piperazine-1,4-Diethanesulfonic de las soluciones tampón ácidos

El nombre completo del tampón PIPES es ácido piperazina-1,4-dietanosulfónico, una sustancia que puede mantener el pH de la solución dentro de un cierto rango.Cuando se añade una cierta cantidad de ácido y alcalino a algunas soluciones, tiene el efecto de obstaculizar el cambio de pH de la solución, lo que se denomina amortiguación.amortiguador biológicoUna solución de este tipo se llama solución tampón. PIPES es un miembro importante del tampón de Goods.que no participa ni interfiere en los procesos bioquímicos.
 
Información básica
 

 
Aplicación de las PIPES
 
No puede formar complejos estables con la mayoría de los iones metálicos y es adecuado para amortiguar en sistemas de solución que contienen iones metálicos.Se aplicó a la purificación de la tubulina mediante cromatografía de fosfato de celulosaLas proteínas recombinantes de unión al GTP purificadas ARF1 y ARF2 se purificaron mediante filtración por gel y se utilizaron como tampón para cristalizar la cetoenzima de E. coli.porque las PIPES pueden formar radicales libres, no es adecuado para el sistema redox.En la cromatografía por intercambio de cationes se debe utilizar una solución tampón de baja concentración de PIPES porque PIPES tiene una resistencia iónica relativamente alta y su valor pKa depende de la concentración..
 

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Ventajas de las PIPES
 
La pureza (> 99%) es soluble en agua, el proceso es estable y se puede garantizar que el producto es un polvo cristalino blanco puro.
 
El ácido dietanosulfónico de piperazina PIPES tiene una variedad de sistemas de amortiguación,entre las cuales se puede utilizar la solución tampón Transformation Buffer (también llamada solución TB) para preparar células competentes de alta eficiencia.
Competent state refers to a special physiological state in which cells (or bacteria) can take up DNA molecules from the surrounding environment and are not easily broken down by restriction endonucleases in the cellAlgunas bacterias son naturalmente competentes, como Bacillus subtilis, y algunas son artificialmente competentes, como Escherichia coli.Tratar las células receptoras con un método especial puede cambiar la permeabilidad de la membrana celular, lo que la convierte en una célula competente que permite que las moléculas portadoras con ADN extraño pasen.
Preparación del amortiguador de transformación:
 

La transformación de células bacterianas competentes se realiza mediante el método del cloruro de calcio.37 grados durante la noche hasta que crezca una sola coloniaSeleccione una colonia con un diámetro de 1-3 mm para inocular el medio SOB en un matraz Erlenmeyer de 250 ml/3L o un matriz Erlenmeyer de 80 ml/1L. Incuba a 18 grados a 150-250 RPM durante 19-50 h.Detenga el cultivo cuando la dosis sea de 0..4 a 0.8, enfriar en agua helada a 4 grados durante 10 minutos, centrifugar a 300 RPM durante 15 minutos, recuperar las bacterias después de eliminar el supernatante, suspender en 1/3 de volumen de solución de tuberculosis fría con hielo,y centrifugar de nuevo durante 10 minutos para recuperar las bacterias. Suspender con 1/12,5 vol. de TB, añadir DMSO con una concentración final del 7%, enfriar durante 10 minutos en aliquotas de 0,1-1 ml y almacenar directamente en nitrógeno líquido o a -80°C.
 

Embalaje del producto
En la solución de tuberculosis de Escherichia coli en suspensión, los componentes principales incluyen el tampón PIPES y el cloruro de calcio para transformar las células en competentes.Cabe señalar que este método es adecuado para E. coli que no contienen plásmidos y no es adecuado para plásmidos grandes. La eficiencia de transformación puede reducirse después de la crioconservación.la DO600 óptima de las diferentes cepas bacterianas también es diferente, y debe ajustarse según diferentes experimentos.
Hay muchos métodos para preparar células competentes con TB, y la eficacia de los diferentes métodos puede ser diferente, y las cepas o tipos de células aplicables también pueden ser diferentes.Puerto de seguridad de las tuberíasEl producto Desheng es un reactivo en polvo, y se pueden preparar soluciones competentes de tuberculosis según las diferentes necesidades.