Método de preparación Ácido 1,4-Piperazinedietanosulfónico tampón 5625-37-6

Ácido dietanosulfónico de piperazinaPuerto de seguridad de las tuberíastiene una variedad de sistemas de amortiguador, entre los que se puede utilizar la solución de amortiguador Transformation Buffer (también llamada solución TB) para preparar células competentes de alta eficiencia.

Competent state refers to a special physiological state in which cells (or bacteria) can take up DNA molecules from the surrounding environment and are not easily broken down by restriction endonucleases in the cellAlgunas bacterias son naturalmente competentes, como Bacillus subtilis, y algunas son artificialmente competentes, como Escherichia coli.Tratar las células receptoras con un método especial puede cambiar la permeabilidad de la membrana celular, lo que la convierte en una célula competente que permite que las moléculas portadoras con ADN extraño pasen.

Polvo de tuberías

Materia prima de la solución de tuberculosis competente - PIPES en polvo

Preparación del amortiguador de transformación:

La transformación de células bacterianas competentes se realiza mediante el método del cloruro de calcio.37 grados durante la noche hasta que crezca una sola coloniaSeleccione una colonia con un diámetro de 1-3 mm para inocular el medio SOB en un frasco Erlenmeyer de 250 ml/3L o en un frasco Erlenmeyer de 80 ml/1L. Incuba a 18 grados a 150-250 RPM durante 19-50 h.Detenga el cultivo cuando la dosis sea de 0..4 a 0.8, enfriar en agua helada a 4 grados durante 10 minutos, centrifugar a 300 RPM durante 15 minutos, recuperar las bacterias después de eliminar el supernatante, suspender en 1/3 de volumen de solución de tuberculosis fría con hielo,y centrifugar de nuevo durante 10 minutos para recuperar las bacterias. Suspender con 1/12,5 vol. de TB, añadir DMSO con una concentración final del 7%, enfriar durante 10 minutos en aliquotas de 0,1-1 ml y almacenar directamente en nitrógeno líquido o a -80°C.

En la solución de tuberculosis de Escherichia coli en suspensión, los componentes principales incluyen el tampón PIPES y el cloruro de calcio para transformar las células en competentes.Cabe señalar que este método es adecuado para E. coli que no contienen plásmidos y no es adecuado para plásmidos grandes. La eficiencia de transformación puede reducirse después de la crioconservación.la DO600 óptima de las diferentes cepas bacterianas también es diferente, y debe ajustarse según diferentes experimentos.

Existen muchos métodos para preparar células competentes para la tuberculosis, y la eficacia de los diferentes métodos puede ser diferente, y las cepas o tipos de células aplicables también pueden ser diferentes.El PIPES producido por Desheng es un reactivo en polvo, y se pueden preparar soluciones competentes de tuberculosis según las diferentes necesidades.

Embalaje del producto

Desheng Biochemical es un fabricante especializado en la producción deamortiguadores biológicosLos productos tampón incluyen el Tris ((Hydroxymethyl) Aminomethane, 4- ((2-Hydroxyethyl)-1-Piperazineethanesulfonic Acid, 3-Cyclohexylaminopropanesulfonic Acid, etc., todos con una pureza superior al 99%,Si es necesario, los amigos de negocios pueden contactarnos.!