Ciclohexilamina 1135-40-6 de CAS CAPS Propanesulfonic ácido en el experimento

La ciclohexilamina CAPS ácido propanesulfonic es una materia prima bioquímica de uso general. Puede ser utilizada como agente endurecedor para los flujos, los desecantes, y los isocianatos a base de agua en capas. En la industria bioquímica, se utiliza generalmente como almacenador intermediario biológico. Según su contenido de la pureza y de impureza, la industria del uso es también diferente.

Desde el punto de vista de la estructura molecular, CAPS es un ácido sulfamic n-sustituido del ciclohexano con un peso molecular de 221,32 y anfótero. Es un almacenador intermediario biológico muy bueno con una gama de almacenador intermediario del pH de 9.7-11.1. Se utiliza generalmente para los experimentos del WB. Almacenador intermediario para la membrana de la transferencia del NC de la membrana o de la nitrocelulosa de la transferencia de la proteína PVDF.

El WB representa el experimento immunoblotting de la proteína occidental de la mancha blanca /negra. El principio es colorear las células o las muestras biológicas tratadas por electroforesis del gel con los anticuerpos específicos, y obtiene la expresión de proteínas específicas en las células analizadas o de tejidos analizando la posición y la profundidad del colorante. Información. Las notas experimentales son como sigue:

Reactivo de CAPS

1. Electroforesis de SDS-PAGE: similar al método ácido nucléico del hibridación, salvo que detectado es la proteína, la punta de prueba es el anticuerpo, y al anticuerpo secundario coloreado se etiqueta. Hablando en términos generales, el sistema del almacenador intermediario de la Tri glicerina o de Tris-Tricine se utiliza para las proteínas de poco peso molecular, y el sistema del almacenador intermediario de CAPS es mejor para las proteínas de molecularidad elevada del peso. La glicocola en el almacenador intermediario afectará a secuencia, así que el almacenador intermediario de la transferencia usado para ordenar es metanol del 10mM/1CAPS10%. La concentración de metanol en el almacenador intermediario electroimprinting de CAPS es 0-20%. Generalmente, un almacenador intermediario con una alta concentración del metanol tiene un buen efecto de la transferencia sobre las proteínas de poco peso molecular, mientras que un almacenador intermediario con una concentración baja del metanol o aún ningún metanol es bueno para las proteínas de molecularidad elevada del peso. Transferencia.

2. Cuando se procesa la membrana de PVDF, empápela en el metanol por algunos segundos, y después póngala en el almacenador intermediario electroimprinting de CAPS. Las operaciones de la continuación deben evitar que la membrana deseque. Si la membrana de PVDF llega a ser seca, repita los pasos anteriores. El gel de la electroforesis también necesita ser empapado en el almacenador intermediario de CAPS por 5-10 minutos. Algunas proteínas fuertemente básicas no necesitan este paso.

3. Las condiciones de la transferencia son generalmente el voltaje constante 50V, la intensidad actual 100-170mA, y transferencia del electroimprint en la temperatura ambiente. Las burbujas entre el gel y la membrana de PVDF deben ser quitadas. Para las proteínas con un peso molecular más alto, preste la atención para prolongar el tiempo de transferencia.

4. Antes de teñir, la membrana de PVDF necesita ser sacada y ser aclarada con agua desionizada, empapada en metanol, después teñió con 0,1% azules brillantes de Coomassie por 30-50 segundos, decolorados con metanol del 50%, lavados con agua desionizada y secados.

El antedicho introduce algunas materias que necesitan la atención en la proteína que imprime el experimento. Además del experimento sí mismo, la tecnología de Desheng le recuerda que para la seguridad y sanidad, lleve por favor la ropa del laboratorio y lleve los guantes disponibles para la operación. El almacenador intermediario de electro-impresión de CAPS se recomienda para ser producido por Desheng la configuración del ácido propanesulfonic de la ciclohexilamina de alta calidad.