Cuál es tripsina
La tripsina (C6H15O12P3) es una clase de proteasa. En vertebrados, funciona como una enzima digestiva. En el páncreas, se sintetiza como precursor de la enzima tripsinógena. Se secreta como componente del jugo pancreático y se descompone en la tripsina activada bajo restricción del enterokinase o de la tripsina. Es una endopeptidasa que puede cortar el lado carboxilo de los residuos de la lisina y de la arginina en la cadena del polipéptido. No sólo funciona como una enzima digestiva, pero también limita la descomposición de los precursores de otras enzimas tales como chymotrypsinogen, carboxipeptidasa, y fosfolipasa, y tiene un efecto que activa. Es la proteasa más específica, y se ha convertido en una herramienta imprescindible en la determinación de la secuencia de aminoácido de una proteína.
Introducción de tripsina porcina
La masa molecular relativa de tripsinógeno porcino es cerca de 24 000. Según la diferencia en punto isoeléctrico, tripsinógeno porcino se puede dividir en aniónico (pl6.8<6>). Porque el tipo catiónico no sólo tiene una gravedad específica más grande, pero también tiene mejor estabilidad que el tipo aniónico, el tripsinógeno porcino catiónico fue seleccionado para la construcción y la expresión. Tripsinógeno porcino contiene 12 cisteínas, que pueden formar 6 pares de enlaces de disulfuro (30-160, 48-64, 132-233, 139-206, 171-185, 196-220), que aumentaron grandemente la dificultad de la desnaturalización y la renaturalización de los cuerpos de inclusión en experimentos subsiguientes.
Uso de la tripsina porcina
La tripsina porcina es una clase de tripsina, que se puede utilizar como añadido para el retiro de las células adherentes superficiales, la producción de vacunas del virus de gripe, insulina y otras proteínas, la hidrólisis rápida de proteínas, y el tratamiento previo de las células y de los tejidos animales. Hay una demanda grande para la tripsina con pureza elevada y actividad fuerte. Actualmente, un proceso de la preparación de tripsinógeno porcino recombinante se ha establecido, y la tripsina porcina recombinante obtenida tiene buena actividad enzimática y no contiene la otra contaminación animal de la fuente, que proporciona cierta base experimental para la investigación y la producción industrializadas.
Características de la tripsina porcina
La tripsina porcina es inestable en naturaleza y autólisis propenso. Al construir un sistema tripsinógeno porcino recombinante de la expresión, esta característica del autólisis hace difícil para que el sistema eucariótico de la expresión obtenga tripsinógeno completo, y el producto activado afectarán al anfitrión. Las células pueden también ser tóxicas, así que considere elegir un sistema procariótico de la expresión. Además, las características del autólisis requieren que las condiciones de la activación de tripsinógeno porcino también necesitar ser controlado estrictamente.
Método de la preparación de tripsina porcina
En el método tradicional de la preparación, hay mucho pasos de la separación y de la purificación y una época larga, que es fácil causar daño a la proteína y a la inactivación de la causa. Dando por resultado la producción baja. Por lo tanto, la preparación y la producción de tripsina porcina ha desplazado gradualmente de la extracción del páncreas animal a la producción recombinante de la expresión. La producción de tripsina construyendo un sistema tripsinógeno-derivado porcino recombinante de la expresión de Escherichia Coli puede también evitar el riesgo de contaminación relacionada el patógeno y el riesgo de llevar los virus desconocidos debido al origen animal del donante.
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