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Which buffer Tris or EPPS is suitable for Folin phenol method to detect protein?

2021-06-10
Which buffer Tris or EPPS is suitable for Folin phenol method to detect protein?

El rango de amortiguación de Tris es de aproximadamente 6-8, lo que es adecuado para la mayoría de los experimentos bioquímicos, especialmente en los experimentos de investigación relacionados de proteínas y ácidos nucleicos;Puertor del EPPSEl experimento de investigación es más caro que el de Tris, así que ¿cuál es el adecuado para el método de fenol de Folin para detectar el experimento de proteínas?


El método del reactivo folin-fenol es un método básico comúnmente utilizado para determinar la concentración de proteínas y ha sido ampliamente utilizado en el campo de la bioquímica.El EPPS (HEPPS) se utiliza generalmente como tampón para el método del fenol de folina para detectar el contenido de proteínas, en lugar de usar el amortiguador de Tris.


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Los tampones Tris y EPPS se utilizan para la detección del contenido de proteínas.


El principio de coloración del método del fenol de Folin para la determinación del contenido de proteínas es el mismo que el del método del biureto (pero no se puede utilizar EPPS para la detección del biureto/biureto).La diferencia es que el segundo reactivoPara aumentar la cantidad de color, mejorando así la sensibilidad de detección de proteínas.La ventaja del método del fenol de la folina para la detección del contenido de proteínas es que tiene una alta sensibilidad y es mucho más sensible que el método del biuret.Por supuesto, también tiene algunas desventajas que toma mucho tiempo, la curva estándar no es recta, la especificidad es pobre, y hay más sustancias interferentes.


Cualquier grupo que interfiera con la reacción de biuret, tales como -CO-NH2, -CH2-NH2, CS-NH2 y el tampón Tris, sacarosa, sulfato de amonio y compuestos sulfhidrilo,puede interferir con la reacción folina-fenol y afectar a esta última mucho másAdemás, los fenoles y el ácido cítrico también interfieren con esta reacción.


El reactivo folin-fenol está compuesto por dos reactivos, el primero de los cuales consiste en carbonato de sodio, hidróxido de sodio, sulfato de cobre y tartrato de sodio de potasio.El enlace peptídico en la proteína reacciona con la solución de tartrato de cobre de sodio y potasio bajo condiciones alcalinas para formar un complejo rojo púrpuraEl segundo reactivo está compuesto por ácido fosfomolibdico, ácido fosfotungstico, ácido sulfúrico, bromo, etc. En condiciones alcalinas, el reactivo se concentra en el agua y en el agua.este reactivo se reduce fácilmente por el grupo fenólico de tirosina en la proteína para dar una reacción azulEste método también es adecuado para determinar el contenido de tirosina y triptófano.El rango de medición de este método es de 25-250 μg de proteína..


En resumen, la ventaja del método del fenol de Folin para determinar el contenido de proteínas es su alta sensibilidad, pero la desventaja es que toma mucho tiempo e interfiere.Tris también puede causar interferencias.Desheng produce ambas sustancias.amortiguadores biológicos, no para decir cuál es mejor, sino para ser adecuado para diferentes estudios experimentales.