Which buffer Tris or EPPS is suitable for Folin phenol method to detect protein?

La gama de almacenador intermediario de Tris es cerca de 6-8, que es conveniente para la mayoría de los experimentos bioquímicos, especialmente en los experimentos relacionados de la investigación de la proteína y del ácido nucléico; EPPS es también conveniente para la proteína y el ácido nucléico. ¿El experimento de la investigación es más costoso que Tris, así que cuál es conveniente para que el método del fenol del folin detecte el experimento de la proteína?

El método el reactivo del Folin-fenol es un método básico de uso general determinar la concentración de la proteína y ha sido ampliamente utilizado en el campo de la bioquímica. En usos prácticos, EPPS (HEPPS) se utiliza generalmente como almacenador intermediario para que el método del fenol del folin detecte el contenido proteínico, bastante que usando el almacenador intermediario de Tris.

El almacenador intermediario Tris y EPPS se utiliza para la detección del contenido proteínico

El principio que colorea del método del fenol del folin para la determinación del contenido proteínico es lo mismo que el del método del biuret (solamente de EPPS no puede ser utilizado para el biuret/la detección del biuret). La diferencia es que el segundo reactivo, el reactivo del Folin-fenol, está añadido. Para aumentar la cantidad de color, de tal modo mejorando la sensibilidad de detectar las proteínas. La ventaja del método del fenol del folin para detectar el contenido proteínico es que tiene alta sensibilidad y es mucho más sensible que el método del biuret. Por supuesto, también tiene algunas desventajas que tarda un tiempo largo, la curva estándar no es recta, la especificidad es pobre, y hay más sustancias de interferencia.

Cualquier grupo que interfiera con la reacción del biuret, tal como - CO-NH2, - almacenador intermediario de CH2-NH2, de CS-NH2 y de Tris, sucrosa, sulfato del amonio, y compuestos del sulfidrilo, puede interferir con la reacción del Folin-fenol y afectar a estos últimos mucho más grandes. Además, fenoles y ácido cítrico también interferir con esta reacción.

el reactivo del Folin-fenol consiste en dos reactivo. El reactivo uno consiste en el carbonato sódico, el hidróxido de sodio, el sulfato de cobre y el tartrato de sodio de potasio. El enlace de péptido en la proteína reacciona con la solución del tartrato del cobre del sodio del potasio bajo condiciones alcalinas para formar un complejo púrpura-rojo. El segundo reactivo se compone del ácido fosfomolíbdico, ácido fosfotúngstico, ácido sulfúrico, bromo y así sucesivamente. Bajo condiciones alcalinas, este reactivo es reducido fácilmente por el grupo fenólico de tirosina en la proteína para dar una reacción azul, y su intensidad del color es proporcional al contenido proteínico. Este método es también conveniente para determinar el contenido de la tirosina y del triptófano. La gama de la medida de este método es la proteína 25-250μg.

En resumen, la ventaja del método del fenol del folin para determinar el contenido proteínico es alta sensibilidad, pero la desventaja es que tarda un tiempo largo e interfiere. Tris puede también causar interferencia. El almacenador intermediario de EPPS debe ser utilizado. Desheng produce ambos almacenadores intermediarios, para no decir cuál es mejor, pero ser conveniente para diversos estudios experimentales.