¿Cuándo usted utilizaría un almacenador intermediario de Hepes?

El nombre completo de HEPES es ácido ethanesulfonic del hydroxyethylpiperazine 4, CAS es 7365-45-9, HEPES es de uso frecuente en los almacenadores intermediarios biológicos, gama de almacenador intermediario del pH: 6.8-8.2, el componente principal del almacenador intermediario de los hepes es ácido sulfúrico de etilo del hydroxyethylpiperazine, HEPES es un almacenador intermediario anfótero, que es soluble en agua y no forma complejos estables con los iones del metal. Tiene una buena capacidad tapón en la gama del pH de 7.2-7.4. Se utiliza sobre todo en equipos de diagnóstico bioquímicos de los equipos, de la extracción de DNA/RNA y equipos de diagnóstico de la polimerización en cadena.

Utilizado en una variedad de reacciones bioquímicas:

1. El almacenador intermediario de HEPES es de uso frecuente como reactivo del almacenador intermediario en el medio del cultivo celular de diversos tipos de organismos, adherencia de la célula-célula, agregación y cultura a corto plazo de célula, y almacenador intermediario para los tejidos y las células de limpieza;

2. En la investigación de la proteína, los TUBOS son de uso frecuente como el componente y el eluyente del almacenador intermediario obligatorio en cromatografía del intercambio catiónico;

3. En la investigación de la DNA, los TUBOS se utilizan como almacenador intermediario para el sistema de la formación del fosfato de calcio y del precipitado de la DNA, y como almacenador intermediario para el AFM y los experimentos de la electroporación.

4. Además, HEPES tiene cierta interferencia a la reacción entre la DNA y las enzimas de la restricción, y no es conveniente que el método de Lowry determine el contenido proteínico.

5. El almacenador intermediario de HEPES es de uso frecuente en la investigación de organelos y las proteínas y las enzimas altamente variables, pH-sensibles, así como los equipos de diagnóstico bioquímicos, los equipos de la extracción de DNA/RNA y los equipos de diagnóstico de la polimerización en cadena.

6. El almacenador intermediario de la reacción, almacenador intermediario del pre-hibridación, y almacenador intermediario del hibridación para separar y analizar componentes nucleares del ARN; utilizado para el ARN y T4RNA. El grado de la biología molecular se utiliza para etiquetar el 3' - extremo del ARN con la ligasa del ARN T4, para separar y para analizar los componentes del almacenador intermediario de la reacción, el almacenador intermediario del pre-hibridación y el almacenador intermediario del hibridación del ARN nuclear.

Temas relacionados de HEPES

1. El pH requerido para la mayoría de las células es 7.2-7.4, pero el pH apropiado para el cultivo celular varía con los tipos de células que son cultivadas. Los fibroblastos prefieren un más de gran alcalinidad (7.4-7.7), mientras que el paso de variedades de células transformadas requiere acidez. pH (7.0-7.4). Puesto que la mayoría de los líquidos de la cultura son protegidos por el sistema del bicarbonato de sodio (NaHCO3) y de CO2, la concentración del CO2 en la fase de gas debe estar en equilibrio con la concentración del bicarbonato de sodio en el líquido de la cultura. Si la concentración del CO2 en la fase de gas o en el aire de la incubadora se fija en el 5%, la cantidad de NaHCO3 añadió en la solución de la cultura es 1.97g/L; si la concentración del CO2 se mantiene en el 10%, la cantidad de NaHCO3 añadió en la solución de la cultura es 3.95g/L. La cápsula del cultivo celular no se debe atornillar demasiado firmemente para asegurar intercambio del gas;

2. El valor de pH de la solución de la cultura usando los pares del almacenador intermediario de HCO3 y del CO2 es inestable y tiende a ser alcalino después del almacenamiento por cierto periodo de tiempo. Si el pH de los cambios flúidos de la cultura demasiado rápidamente, almacenador intermediario de HEPES se puede añadir al líquido de la cultura a una concentración final de 10-25mM;

3. HEPES es un almacenador intermediario anfótero, usado sobre todo en la investigación biológica tal como fosforilación oxidativa, síntesis de la proteína en un ambiente estéril, fosforilación fotosintética, fijación del CO2, etc.; HEPES no tiene ningún efecto sobre los substratos del ionase del metal y es conveniente para la transmisión en la microscopia electrónica (TEM); en medios del cultivo celular, la ventaja es que puede mantener un valor de pH relativamente constante durante la observación abierta de la cultura o de la célula. HEPES (25mM) se puede utilizar como substituto para el almacenador intermediario del bicarbonato, o como adición del almacenador intermediario del bicarbonato (10-15mM) para aliviar la restricción del ambiente de la cultura del CO2 de la alto-concentración. El CO2 y el bicarbonato disueltos son también muy importantes para el buen crecimiento de la célula.