El inmunoensayo por quimioluminiscencia no solo es el método de inmunoensayo de desarrollo y popularización más rápido, sino también la tecnología de inmunoensayo de etiqueta más avanzada.Su sensibilidad y precisión son varios órdenes de magnitud más altos que el método de inmunoensayo enzimático y fluorescencia. Puede reemplazar completamente el radioinmunoensayo y eliminar completamente el inmunoensayo ligado a enzimas. Tiene principalmente las ventajas de alta sensibilidad, alta especificidad, bajo precio del reactivo,Reactivo estable y largo período de validez (6-18 meses), método estable y rápido, amplio rango de detección, operación sencilla y alto grado de automatización.
El reactivo quimioluminiscente utilizado como marcador deberá cumplir las siguientes condiciones:
LuminolLos agentes luminiscentes con éster de acridina se utilizan comúnmente para etiquetar los agentes luminiscentes que cumplen las siguientes condiciones:
1Puede participar en la reacción de quimioluminiscencia.
2Puede formar un reactivo conjugado estable después de acoplarse con antígeno o anticuerpo.
3Después del acoplamiento, el efecto cuántico y la cinética de reacción se mantienen.
4Las propiedades fisicoquímicas, especialmente la actividad inmune, de las sustancias etiquetadas no deben modificarse o cambiarse raramente.
Clasificación de los marcadores utilizados en el ensayo inmunológico por quimioluminiscencia
1 Agente quimioluminiscente directo
El agente quimioluminiscente directo se refiere al etiquetado directo de antígeno o anticuerpo con agente quimioluminiscente, que incluye principalmente los siguientes tipos.
1 Cuando el éster de acridina se oxida por H2O2 en condiciones alcalinas, emite luz con una longitud de onda de 470 nm y tiene una alta eficiencia luminosa.Su producto en estado excitado N-metil acridona es el iluminante del sistema de reacción luminosaLos agentes luminiscentes del éster de acridina pueden usarse directamente para etiquetar haptens y proteínas.la producción de cuantas de luz no se reduce después de la uniónEl ester de acridina es un sustrato luminiscente ideal.
2Tripiridina rutenio Tripiridina rutenio es un agente de electroquimioluminiscencia.Puede perder un electrón en la superficie del electrodo del ánodo al mismo tiempo que la tripropilamina (TPA) donante de electrones.
2 Agente luminiscente de reacción enzimática: el agente luminiscente (substrato) emite luz por catálisis de enzimas etiquetadas (peroxidasa de rábano y fosfatasa alcalina).
1El agente luminiscente catalizado por la peroxidasa del rábano picante es el luminol y sus derivados; además, el isolinol y sus derivados tienen propiedades de quimioluminiscencia.El luminol es la primera sustancia luminiscente sintetizada.
2El sustrato luminiscente catalizado por la fosfatasa alcalina es amppd, amppd.Agente quimioluminiscenteHay dos partes importantes en su estructura molecular. Una es el anillo de dioxígeno que conecta el anillo de benceno y adamantano, que puede romper y emitir fotones; el otro es el grupo fosfato, que es el principal componente de la molécula.que mantiene la estabilidad de toda la estructura molecular.
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