Cuáles son los principios y los métodos para detectar las fuentes de diversas especies de sodio de la heparina

Actualmente,heparina sódicase obtiene principalmente de la mucosa intestinal de cerdos, bovinos y ovinos; sin embargo, el acero heparino de origen bovino y ovino corre el riesgo de ser infectado por virus afines,y la incidencia de reacciones adversas como trombocitopenia y síndrome de trombosis es mucho mayor que la de la heparina de acero derivada del cerdoPor lo tanto, en el uso clínico, la gente debe tratar de elegir heparina de sodio porcino. Sin embargo, en la producción real, debido a varias razones tales como fuentes complejas de materiales de producción,las materias primas de producción procedentes de cerdos están a menudo contaminadas por materias animales procedentes de bovinos y ovinosPor lo tanto, el establecimiento de métodos para la identificación de los ingredientes procedentes de cerdos, ovinos,El uso de productos derivados de bovinos y de otras fuentes animales es esencial para controlar la calidad de los medicamentos y prevenir la contaminación de los ingredientes xenogénicos de origen animal..

A continuación se habla brevemente sobre el principio de detección de diferentes especies de heparina de sodio, el principio de detección: heparina de sodio es un glucosaminoglicano, que se compone de ácido urónico (L.Ácido idurónico, IdoA; D-glucosa Ácido urónico (GlcA) y glucosamina (6[.D-glucosamina, GlcN) son una mezcla de cadenas de polisacáridos con diferentes longitudes de cadena.La heparinasa se utiliza para hidrolizar enzimáticamente la heparina sódica de diferentes especies., y sus productos de hidrólisis enzimática se analizan y estudian; es decir,la fuente de este producto se caracteriza por la proporción de composición de los productos de la hidrólisis enzimática (mezcla de disacáridos).

La heparinasa es un tipo de lisasa polisacárida que actúa sobre las moléculas de heparina o sulfato de heparan; hay tres tipos de heparinasa, a saber, heparinasa I, heparinasa II y heparinasa III.Dado que cada heparinasa tiene una especificidad de sustrato únicaLa heparinasa 1 descompone el enlace glicosídico Oc ((1-4) entre GlcNs ((6S) e IdoA ((2S),y puede cortar el sitio del pentasacárido de unión de antitrombina III en la molécula de heparinaEl azúcar contiene 2 o 3 grupos sulfatados de heparina, por lo que su especificidad no es fuerte; la heparinaza II1 descompone el GlcNS sin sulfato de 6 posiciones o IV.Heparina de acetil glucosamina (GlcNAc) (véase la Figura 1)La mezcla adecuada de las tres heparinasas puede degradar completamente la heparina en una mezcla de disacáridos insaturados con absorción ultravioleta a 234 nm.

La detección de la fuente de especies de heparina utiliza principalmente la PCR cuantitativa para detectar el sodio de heparina de diferentes especies, pero este método es costoso.El método de hidrólisis enzimática de la heparinasa puede identificar eficazmente las muestras de heparina mezcladas con heparina cruda derivada de ovejasLa única desventaja es que la heparinasa perderá la información del epímero de ácido urónico durante la hidrólisis enzimática de la heparina.No se puede distinguir entre ácido glucurónico e ácido idurónicoAdemás, en los últimos años, se han desarrollado métodos para separar diversos disacáridos por electroforesis capilar.La cromatografía de pares iónicos de fase inversa también puede utilizarse para separar los disacáridos de heparina., y combinado con espectrometría de masas para análisis cuantitativo.

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