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La diferencia entre el almacenador intermediario de Tris y el almacenador intermediario de fosfato

2021-06-09
La diferencia entre el almacenador intermediario de Tris y el almacenador intermediario de fosfato

Los amortiguadores biológicos se utilizan a menudo en experimentos de investigación bioquímica y son de extrema importancia.Son un tipo de fluido de acondicionamiento que puede resistir la influencia de una pequeña cantidad de ácido fuerte y álcali desde el exterior y mantener el valor del pH básicamente sin cambiosEntre los amortiguadores biológicos más utilizados se encuentran:El amortiguador de Trissolución, solución de amortiguador PBS, amortiguador CAPS, amortiguador MOPS, amortiguador TAPS y amortiguador EPPS.Este artículo comparará e introducirá la solución de tampón Tris y la solución de tampón PBS más comúnmente utilizadas desde varios aspectos.


1Rango de amortiguador


Tris es una base débil con una fórmula molecular de C4H11NO3, un peso molecular de 121.14, y un pKa de 8,1 a 25 °C. El rango de amortiguador efectivo de su amortiguador se encuentra entre el pH 7,0 y 9.2Los valores de pH comúnmente utilizados en experimentos bioquímicos son 6.8, 7.4, 8.0, y 8.8El Tris se utiliza ampliamente en la preparación de amortiguadores en experimentos de bioquímica y biología molecular, e incluso tiende a exceder los amortiguadores de fosfato.


La solución salina tamponada con fosfato (PBS) es una solución salina con fosfato como tampón de pH y cloruro de sodio como equilibrio de presión osmótica.Los buffers de fosfato de sodio y fosfato de potasio se utilizan comúnmenteDebido a su disociación secundaria y a una amplia gama de valores de pH tampón, son las soluciones tampón más utilizadas en la investigación bioquímica.


2Método de configuración


Hay dos maneras de preparar el tampón Tris-HCl: preparar soluciones de Tris y HCl por separado, y luego mezclar de acuerdo con los volúmenes enumerados en la tabla común.porque la concentración estándar de ácido clorhídrico diluido no es fácil de preparar, se utiliza comúnmente otro método: tomemos como ejemplo la configuración del amortiguador Tris-HCl: primero se disuelve la base Tris en 950 ml de agua desionizada, se añade HCl a gota a gota mientras se agita,y utilizar El medidor de pH mide el valor de pH de la solución hasta el valor de pH requerido, y luego añade agua.


Método de preparación de la solución tampón de fosfato: pesar NaCl, KCl, KH2PO4 y K2HPO4, disolverlos en 800 ml de agua destilada, ajustar el pH de la solución a 7,4 con HCl,y finalmente añadir agua destilada para hacer el volumen a 1 LPuede almacenarse en refrigerador a 4 °C. Cabe señalar que la concentración habitual se refiere a la concentración de todos los fosfatos en la solución tampón, no a la concentración de Na+ o K+.Na+ y K+ sólo se utilizan para ajustar la presión osmótica. La sal de potasio es mejor que la sal de sodio cuando se configura una solución tampón de fosfato. La sal de sodio no es fácil de disolver a baja temperatura, mientras que la sal de potasio tiene una solubilidad relativamente mayor.


3. Área de uso

La solución tampón Tris forma un sistema tampón con glicina en el tampón de electroforesis para estabilizar el pH; el sistema tampón Tris-HCl se utiliza en el gel para estabilizar el pH;se utiliza ampliamente como disolvente para ácidos nucleicos y proteínasLa baja resistencia iónica del amortiguador Tris es también puede ser utilizado para formar las fibras intermedias de los nematodos; añadir EDTA al amortiguador de ácido clorhídrico Tris para hacer "amortiguador TE",que puede utilizarse para la estabilización y almacenamiento del ADN; cambiar la solución de ácido de ajuste de pH a ácido acético para obtener "tampón TAE", cambiar a ácido bórico para obtener tampón TBE. Estos dos tampones se utilizan a menudo en experimentos de electroforesis de ácidos nucleicos.


Solución tampón de fosfato En general, las preparaciones biológicas activas deben diluirse con solución tampón de fosfato.La razón es que tiene un equilibrio de sal y un efecto amortiguador que puede ajustar el valor de pH apropiadoEl agua destilada no tiene ningún efecto de equilibrio salino, lo que destruirá la estructura y las propiedades biológicas de las proteínas biológicas; la solución salina fisiológica no tiene el efecto de ajustar el pH,y no puede garantizar que participe en reacciones biológicas en condiciones óptimas para las sustancias activas y completasPor supuesto, el PBS no es una panacea. Algunas sustancias biológicamente activas requieren condiciones relativamente altas.y más ingredientes deben añadirse al búfer de equilibrio para mantener las mejores condiciones para garantizar que las sustancias biológicamente activas conserven sus características más completasPor lo tanto, el PBS se utiliza principalmente para experimentos con células, y su rango de amortiguación es más adecuado para neutro.


En el experimento bioquímico, la solución tampón debe seleccionarse cuidadosamente, no sólo el rango de tampón de la solución tampón,pero también el entorno de uso de la solución tampón debe considerarse de manera integralHubei New Desheng Materials se ha especializado en la producción y desarrollo deamortiguadores biológicosDesheng cuenta con un equipo independiente de I+D y una amplia experiencia práctica en el desarrollo y producción de productos.Los amortiguadores biológicos y otros productos producidos por Desheng se han vendido a muchos países del mundo., y han sido recomprados con elogios, y han alcanzado una cooperación a largo plazo con muchos clientes extranjeros.Desheng da la bienvenida a sus llamadas.