El uso del almacenador intermediario de HEPES
HEPES (4 (2-Hydroxyethyl) - ácido 1-piperazineethanesulfonic) es un almacenador intermediario zwitterionic, CAS No. 7365-45-9, este almacenador intermediario se utiliza generalmente en experimentos bioquímicos para ajustar el pH del sistema de reacción, tal como solución de la preservación del virus o solución de la preservación de la célula. No tiene ningún tóxico en las células, y mantiene el pH durante mucho tiempo, es siempre aplicado en medio y cosméticos del cultivo celular.
HEPES es un almacenador intermediario anfótero no iónico con buena capacidad tapón en la gama del pH de 7.2-7.4. Su característica importante es mantener un valor de pH relativamente estable en medio de cultivo o la observación de la célula. Bajo estos estándares, los casquillos de los frascos del cultivo celular se deben apretar firmemente para evitar el carbonato requerido que se escapa en el aire.
La manera de preparar el almacenador intermediario de HEPES.
El almacenador intermediario de Hepes se puede añadir directamente en el medio de cultivo preparado con la concentración requerida, seguida por la esterilización del filtro. Añada 2,38 gramos de polvos de HEPES a cada 1000ml de la solución de la cultura, ajuste el pH a 7,2 con 1NNaOH después de disolver, filtre y esterilícelo antes de aplicar, en este tiempo, la concentración de HEPES es 10mmol/L.
Añadiendo el solvente medio del cultivo celular 99ml en la solución común 1ml, la concentración de HEPES es también 10mol/L.Below es la manera de preparar la solución común de HEPES con 1mol/L. Primero, 23.8g de disolución HEPES en el agua doble destilado 90ml; En segundo lugar, ajustando el pH a 7.5-8.0 con NaOH 1N; Tercero, componiendo a 100ml con el valorante del agua; Adelante, filtrando y esterilizando antes de embalado en la botella 2ml; En el último almacenado en 4℃ o -20℃.
Con resistente de alta temperatura y el punto de fusión hasta 200°C, el polvo de HEPES no será degradado por la autoclave. Según la literatura relevante, si la solución acuosa de HEPES se expone a la luz ambiente por tres horas, el peróxido de hidrógeno tóxico (H2O2) será generado. Por lo tanto, 2 puntos necesitan ser prestados la atención a, una son los HEPES que la solución acuosa se debe guardar lejos de luz para no afectar a los resultados experimentales. Después de ser configurado como solvente, debe ser almacenada en el °C 4 y ser utilizada en un corto período de tiempo para mejores resultados. Otro se coloca en un cuarto seco y no se puede generalmente exponer directamente a la luz del sol durante mucho tiempo.
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