Efecto protector del aminomethane (hidroximetílico) de los tris sobre roturas del filamento de la DNA

El daño de radiación de la DNA ocurre generalmente de dos maneras: directo e indirecto. En la acción directa, se ioniza la DNA sí mismo. El efecto indirecto implica la radiólisis de la solución alrededor de la DNA y la interacción subsiguiente entre la DNA y los productos de la radiólisis.

Se estima que los 80% de los efectos mortales de alto DEJAN la radiación son causados por efectos directos. Por lo tanto, es necesario estudiar el daño de la DNA inducido por alto DEJÓ la radiación, que es también útil aclarar el mecanismo molecular del alto efecto biológico relativo de alto DEJÓ la radiación.

En el estudio del daño de la DNA causado por la radiación ionizante, es obviamente útil obtener resultados experimentales más exactos y más confiables para seleccionar el sistema apropiado de la disolución de la DNA. El sistema de disolución más común de DNA es almacenador intermediario del te, y sus componentes principales son 10 mmol/L tris (aminomethane trimetil) y 1 mmol/L EDTA (ácido tetraacético de la etilenediamina) en pH 8,0. Miremos los principios fundamentales del estudio.

La DNA del plásmido PUC19 disuelta en el agua pura, 10 mmol/L Tris, 1 mmol/L llevó el RA y el almacenador intermediario del te fue irradiado por el haz de ion del carbono de 100 keV/P.M. (MeV/U) de la energía inicial 290. La proporción de diversas moléculas de la DNA en diversas soluciones era analizada por electroforesis del gel de la agarosa, y el número medio de las roturas del solo filamento (SSB) y de las roturas del filamento doble (DSB) en cada plásmido era calculado en diversas dosis.

Fue encontrado que Tris podría proteger perceptiblemente la DNA del plásmido contra la irradiación pesada del ion del carbono inhibiendo la producción de SSB y de DSB, mientras que el EDTA podría aumentar la producción de SSB e inhibir la formación de DSB.

Electrophoretogram de la molécula de la DNA pUC19 en diversa dosis de la solución y de la irradiación

Puede ser visto de la figura antedicha que con el aumento de dosis de la irradiación, el porcentaje de la DNA supercoiled en disminuciones totales de la DNA. Comparado con agua y EDTA, el contenido de la DNA supercoiled en Tris y el almacenador intermediario del te disminuyeron lentamente. Cuando la dosis aumentó a 150Gy, el contenido de la DNA supercoiled en el almacenador intermediario de Tris y del te todavía estaba más el de 80%, pero el contenido de la DNA supercoiled en EDTA y agua era menos del 6O%. Los resultados mostraron que la DNA en tri producida menos roturas del filamento que eso en agua y EDTA.

Una serie de resultados muestra que Tris tiene efecto protector obvio sobre el daño de la rotura del filamento de la DNA inducido por 100 keV/L ~ irradiación del ion del carbono de m. En las soluciones tampón de Tris y del te, la DNA supercoiled existió todo el tiempo y mostró la protección obvia comparada con agua y la solución puras del EDTA.