Efecto protector del aminomethane (hidroximetílico) de los tris sobre roturas del filamento de la DNA

Los daños causados por la radiación del ADN suelen ocurrir de dos maneras: directa e indirectamente.El efecto indirecto consiste en la radiólisis de la solución alrededor del ADN y la posterior interacción entre el ADN y los productos de la radiólisis..

Se estima que el 80% de los efectos letales de la radiación alta LET son causados por efectos directos, por lo que es necesario estudiar el daño al ADN inducido por la radiación alta LET,que también es útil para aclarar el mecanismo molecular de alto efecto biológico relativo de alta radiación LET.

TRIS base en polvo

En el estudio del daño del ADN causado por la radiación ionizante, obviamente es útil obtener resultados experimentales más precisos y confiables para seleccionar el sistema de disolución del ADN adecuado.El sistema de disolución más común del ADN es el tampón, y sus componentes principales son 10 mmol/ L de tris (trimetilaminometano) y 1 mmol/ L de EDTA (ácido tetraacético de etilenodiamina) a pH 8.0Veamos los principios principales del estudio.

ADN plasmídico PUC19 disuelto en agua pura, 10 mmol/ LBase de Tris, 1 mmol / L de RA y te tampón fue irradiado por un haz de iones de carbono de 100 keV / p.m (energía inicial 290 MeV / U).La proporción de varias moléculas de ADN en diferentes soluciones se analizó mediante electroforesis de gel de agarosa, y se calculó el número promedio de rupturas de cadena única (SSB) y rupturas de cadena doble (DSB) en cada plásmido a diferentes dosis.

Se encontró que Tris podría proteger significativamente el ADN plasmídico de la irradiación de iones pesados de carbono inhibiendo la producción de SSB y DSB,Mientras que el EDTA podría aumentar la producción de SSB e inhibir la formación de DSB..

Electroforetograma de la molécula de ADN pUC19 en diferentes soluciones y dosis de irradiación

Se puede ver en la figura anterior que con el aumento de la dosis de irradiación, el porcentaje de ADN superenrolado en el ADN total disminuye.el contenido de ADN superenrolado en Tris y el tampón te disminuyó lentamenteCuando la dosis se incrementó a 150Gy, el contenido de ADN superenrolado en Tris y el tampón te seguía siendo superior al 80%, pero el contenido de ADN superenrolado en EDTA y agua era inferior al 60%.Los resultados mostraron que el ADN en tri producía menos rupturas de hebras que en agua y EDTA..

Una serie de resultados muestran que Tris tiene un efecto protector obvio en el daño de ruptura de la hebra de ADN inducido por la irradiación de iones de carbono de 100 keV/L ~ m.el ADN superenrolado existió todo el tiempo y mostró una protección obvia en comparación con agua pura y solución de EDTA.