En los experimentos o ensayos bioquímicos, casi todas las reacciones deben controlarse dentro de un cierto rango de pH, especialmente aquellas que implicanlas enzimasLos cambios en el pH tienen un mayor impacto en la reacción, por lo que se utilizan amortiguadores biológicos para mantener el valor del pH del ambiente de reacción.Muchos de ellos simulan la reacción de detección en el organismo.El cuerpo biológico está regulado por el líquido humoral, por lo que se necesita amortiguador biológico en el experimento.
Hay muchos tipos deamortiguador biológico, y los métodos de preparación son algo diferentes, pero el principio es generalmente el mismo.El hidróxido de sodio generalmente se agrega al ácido conjugado o el ácido clorhídrico se agrega a la base conjugadaAmbos métodos pueden formar una solución tampón con una concentración suficiente de pares ácido-base conjugados.Este es el método de preparación de una pequeña cantidad (aproximadamente 1-2 l) de dihidroxietilglicina Bicina o hidroxietilpiperazina ácido propiónico EPPS:
(1) Solución de 0,1 M (A): Bicina 16.317 g/ agua desionizada 1.000 ml
(2) 0,1 m de solución de NaOH (B):NaOH 4 g/ agua desionizada 1.000 ml
(3) el pH 5,1 1000 ml + 0 ml (B) (A) (A) : (B) = 5-0
PH 7,8 + 200 ml 1000 ml (A) (B) (A) : (B) = 5 a 1
PH 8,2 + 400 ml 1000 ml (A) (B) (A) : (B) = 5-2
PH 8,6 + 600 ml 1000 ml (A) (B) (A) : (B) = o
PH 10,4 + 800 ml 1000 ml (A) (B) (A) : (B) = cinco
(1) Solución de 0,1 M (A): EPPS 25.233 g/ agua desionizada 1.000 ml
(2) 0,1 m de solución de NaOH (B):NaOH 4 g/ agua desionizada 1.000 ml
(3) el pH 5,2 1000 ml + 0 ml (B) (A) (A) : (B) = 5-0
PH 7,3 + 200 ml 1000 ml (A) (B) (A) : (B) = 5 a 1
PH 7,8 + 400 ml 1000 ml (A) (B) (A) : (B) = 5-2
PH 8,2 + 600 ml 1000 ml (A) (B) (A) : (B) = o
PH 8,8 + 800 ml 1000 ml (A) (B) (A) : (B) = cinco
Debe tenerse en cuenta que: la temperatura de preparación se controla a 20 grados. Si se necesita un valor de pH preciso, se puede medir con un medidor de pH A,y luego la proporción de la solución A y la solución B se puede ajustar a un valor de pH específicoSi es necesario excluir los iones de sodio en el medio de ensayo,También es posible sustituir el hidróxido de sodio por hidróxido de potasio y cambiar el peso de acuerdo con el peso molecular correspondiente.
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