Método para estabilizar la enzima y el substrato cromogénico en la reacción de Trinder

En el campo de diagnósticos ines vitro, la colorimetría de la enzima es un método común para la prueba cuantitativa o cualitativa de los componentes de la blanco, y es ampliamente utilizada en China, tal como el método de detección de la coloración de la enzima HRP catalizada por el substrato cromogénico TOOS en la reacción de Trinder. Debido a la participación de enzimas, tiene mucho valor mejorar la estabilidad del substrato del color de la actividad enzimática.

Algunos productos de la reacción con los substratos cromogénicos de la alta absorción molar, tales como TOOS, TOPS, etc., se pueden utilizar en métodos químicos mojados así como métodos químicos secos: los reactivo requeridos de la reacción (TOOS, 4-AAP) y las enzimas requeridas (HRP) etc.) es fijo en el portador de la membrana, y la muestra se añade gota a gota para generar H2O2 y después para lanzar el nuevo oxígeno ecológico, oxida el substrato del color, y determina indirectamente el componente de la blanco con la cantidad del producto de la reacción. Las enzimas son altamente específicas y muy eficientes en catálisis. Sin embargo, tienen estabilidad pobre bajo los efectos de temperatura, de la presión, y de la luz en métodos químicos secos. En métodos químicos mojados, las enzimas se desactivan fácilmente cuando están en un estado líquido o en las concentraciones bajas.

Polvo cromogénico del substrato TOOS

Por otra parte, la mayoría de los substratos cromogénicos, tales como TOOS, MAOS, TMB, etc., también se oxidan fácilmente lentamente, así que sus soluciones no se pueden exponer al aire durante mucho tiempo. Hay muchas maneras de mejorar la estabilidad de enzimas biológicamente activas y de substratos cromogénicos:

1. El adición del agente protector de la solución de la enzima puede hacer la actividad de diversas enzimas tales como ALT, AST, LDH, MONTAÑA, CK en el establo de la matriz de la solución acuosa o del suero por 2 semanas en la temperatura ambiente, pero el efecto sobre el papel de prueba químico seco no es significativo.

2. El método de color-desarrollo de la estabilización del substrato utiliza los tensioactivadores y las sustancias flavonoides del pigmento con un grupo alkílico con 8 a 16 átomos de carbono, pero la fórmula es complicada, los reactivo son difíciles de comprar, y el agente protector interfiere con los resultados de la prueba.

3. Hay un agente protector que es más reducible que el substrato de color-desarrollo, pero el agente protector añadido contiene los grupos aminados primarios y causa a menudo reacciones no específicas.

4. El uso de azoicos como estabilizadores del substrato de color-desarrollo tiene un buen efecto estabilizador y no causa interferencia, pero la longitud de onda máxima de la absorción del tinte está a veces cerca de la del agente de color-desarrollo, que hace el control en blanco un pedazo más arriba.

5. Un agente protector para el polímero y su composición, que pueden mejorar la estabilidad de enzimas y de substratos cromogénicos. Los substratos cromogénicos aplicables incluyen TOOS, 4-AA, los TOPS, MAOS, el etc., convenientes para HRP, CHO, la enzima del etc., convenientes para la detección de glucosa, de creatinina, de ácido úrico, de colesterol, de triglicérido y de otros indicadores.

Puede ser visto que los diversos agentes protectores existentes para las enzimas o los substratos cromogénicos, algunos de los cuales son defectuosos, por ejemplo alto coste, detección en polarización negativa, y solamente conveniente para los métodos químicos mojados, el etc., así mejorando la estabilidad de enzimas y de substratos cromogénicos el método necesita la investigación adicional. Desheng es fabricante de substratos y de enzimas cromogénicos. Se recomienda que usted presta más atención al uso de substratos y de enzimas cromogénicos.