Método para estabilizar la enzima y el substrato cromogénico en la reacción de Trinder

En el campo del diagnóstico in vitro, la colorimetría enzimática es un método común para la prueba cuantitativa o cualitativa de los componentes diana, y se utiliza ampliamente en China,como el método de detección de la reacción de color de la enzima HRP catalizada por el sustrato cromogénicoLos TOOSDebido a la participación de enzimas, es muy valioso para mejorar la estabilidad del sustrato de color de actividad enzimática.

Algunos productos de reacción con sustratos cromogénicos de alta absorbancia molar, como TOOS, TOPS, etc., pueden usarse en métodos químicos húmedos, así como en métodos químicos secos:los reactivos de reacción requeridos (TOOS), 4-AAP) y las enzimas requeridas (HRP) Etc.) Se fija en el portador de la membrana y la muestra se agrega por gotas para generar H2O2 y luego liberar nuevo oxígeno ecológico,oxida el sustrato de colorLas enzimas son muy específicas y muy eficientes en la catálisis.Tienen una baja estabilidad bajo la influencia de la temperaturaEn los métodos químicos húmedos, las enzimas se inactivan fácilmente cuando están en estado líquido o a bajas concentraciones.

Substrato cromogénico TOOS en polvo

Por otro lado, la mayoría de los sustratos cromogénicos, como TOOS, MAOS, TMB, etc., también se oxidan fácilmente lentamente, por lo que sus soluciones no pueden exponerse al aire durante mucho tiempo.Hay muchas formas de mejorar la estabilidad de las enzimas biológicamente activas y de los sustratos cromogénicos:

1La adición de un agente protector en solución enzimática puede hacer que la actividad de varias enzimas como ALT, AST, LDH, ALP, CK en solución acuosa o matriz sérica sea estable durante 2 semanas a temperatura ambiente.pero el efecto sobre el papel de ensayo químico seco no es significativo.

2El método de estabilización del sustrato que desarrolla el color utiliza tensioactivos y sustancias de pigmento flavonoides con un grupo alquilo de 8 a 16 átomos de carbono, pero la fórmula es complicada.Los reactivos son difíciles de comprar., y el agente protector interfiere con los resultados de la prueba.

3Hay un agente protector que es más reducible que el sustrato que desarrolla el color, pero el agente protector añadido contiene grupos amino primarios y a menudo causa reacciones no específicas.

4El uso de colorantes azoicos como estabilizadores del sustrato de desarrollo del color tiene un buen efecto estabilizador y no causa interferencias.pero la longitud de onda máxima de absorción del tinte es a veces cercana a la del agente que desarrolla el color, lo que hace que el control en blanco un poco más alto.

5. Un agente protector para el polímero y su composición, que puede mejorar la estabilidad de las enzimas y los sustratos cromogénicos.adecuado para HRP, CHO, etc. Enzima, adecuado para la detección de glucosa, creatinina, ácido úrico, colesterol, triglicéridos y otros indicadores.

Se puede ver que varios agentes protectores existentes para enzimas osustratos cromogénicos, algunos de los cuales son defectuosos, como el alto costo, la detección sesgada, y sólo son adecuados para métodos químicos húmedos, etc.,El método necesita más investigación.Desheng es un fabricante de sustratos y enzimas cromogénicas. Se recomienda que preste más atención al uso de sustratos y enzimas cromogénicas.