¿La curva anormal de la amplificación de la polimerización en cadena es causada por los medios del transporte del virus?

En la detección ácida nucléica del nuevo coronavirus, la misma tecnología clave es el experimento cuantitativo fluorescente en tiempo real de la polimerización en cadena del ácido nucléico, que es la tecnología de base de la nueva detección del coronavirus. ¿Qué efecto hace tan los medios del transporte del virus usados para el virus que las juntas del muestreo tienen en la amplificación de la polimerización en cadena de ácidos nucléicos? Este artículo hace una breve discusión.

¿El virus transporta medios afectó a la amplificación ácida nucléica de la polimerización en cadena?

Juicio del resultado de la curva de la amplificación de la polimerización en cadena:

El instrumento cuantitativo fluorescente de la polimerización en cadena en la nueva detección de la corona se ha convertido en un equipo rutinario para la investigación de la biología molecular. El desarrollo rápido de este método de detección y la urgencia de la tarea de la detección también han propuesto requisitos más altos para los personales de la detección, requiriéndolos ser peritos en el juicio de los resultados de los datos. Para el juicio del resultado de la polimerización en cadena cuantitativa de la fluorescencia, el juicio más intuitivo es considerar si la curva de la amplificación es normal. En experimentos normales, usted encontrará problemas con las curvas anormales de la amplificación, tales como curvas descontadas de la amplificación, repetibilidad pobre entre los pozos múltiples, y curvas levantadas de la amplificación de muestras negativas.

Razones de la curva anormal de la amplificación de la polimerización en cadena:

1. Confirme si los ajustes del software están correctos. Compruebe las instrucciones del equipo de comprobar si el tiempo, temperatura, número de ciclo, colección de la fluorescencia, los etc. se fijan correctamente, y si el reactivo seleccionado contiene ROX como tinte fluorescente de la referencia. Algunos resultados muestran que la curva de la amplificación del gráfico de varios componentes no está elevada, que es obviamente una muestra negativa, pero la curva del gráfico de la amplificación se eleva, de modo que cruce la línea del umbral, y en lugar de otro tiene un valor del CT. Esto es porque el software incurre en una equivocación en la deducción automática de la línea de fondo. El método manualmente de ajustar la línea de fondo puede ser normal redefiniendo la línea de fondo.

2. Asegúrese de que los materiales consumibles y los accesorios del instrumento estén utilizados correctamente. Los materiales consumibles son más importantes para la polimerización en cadena en tiempo real. Muchas curvas anormales de la amplificación son causadas por el uso incorrecto de materiales consumibles.

3. Para determinar si los reactivo usados son normales, primero determinar si los reactivo son eficaces, incluyendo la comprobación de si los reactivo son dentro del período de la validez, de si están congelados y deshelados en varias ocasiones muchas veces, y si las condiciones del transporte son normales. Si todo el arriba sea normal, después usted tiene que considerar si hay alguna negligencia en los detalles de la operación.

De los puntos antedichos, puede ser visto que los medios del transporte del virus no afectarán directamente a la curva de la amplificación, él afectará solamente a las muestras del virus, pero esto se puede hacer con un experimento de control con las muestras positivas para determinar si la solución de la preservación del virus tiene un impacto en las muestras del virus. Hay dos tipos de medios del transporte del virus de Desheng, el tipo desactivado y el tipo activado es conveniente para los experimentos ácidos nucléicos de la polimerización en cadena.