Instrucciones para el uso del amortiguador HEPES

Ácido 4-hidroxietilpiperazineatansulfónico, denominadoHEPES, CAS No. 7365-45-9, se utiliza generalmente como amortiguador biológico en experimentos bioquímicos.

Propiedades físicas y químicas: HEPES

Fórmula molecular: C8H18N2O4S

Peso molecular: 238.31

Estado: polvo cristalino

PKa:7.45 a 7.65

Rango de amortiguación: 6.8-8.2

Estructura:

Purificación: superior al 99%

Concentración de uso: 10-50 mmol/l

Dependiendo de la aplicación, los amortiguadores HEPES están sujetos a dos sistemas de amortiguador de uso común:

Solución tampón de HEPES: HEPES + NaOH (500 ml): 119,15 g de HEPES se disuelven en 400 ml de agua destilada, se añade 0,5 a 1 ml de solución acuosa de NaOH para ajustar al menos el pH requerido,Preste atención a que el rango de amortiguador de pH efectivo es de 6.8 a 8.2, y luego utilizar agua destilada para hacer el volumen a 500 ml;

2. HEPES solución salina tamponada: HEPES 6,5 g, NaCl 8,0 g, Na2HPO4·7H2O 0,198 g, ajustar el valor del pH con 0,5 M de solución acuosa de NaOH, y hacer el volumen a 500 ml.

3.2×HEPES solución de sal tamponada: Disolver 1,6 g de NaCl, 0,074 g de KCl, 0,027 g de Na2HPO4.2H2O, 0,2 g de glucano o dextrán y 1 g de HEPES en 90 ml de agua destilada,y ajustar al pH requerido con 0.5M de valor de NaOH, luego diluido a 100 ml con agua destilada. En el experimento de adhesión célula-célula, contiene iones de calcio y magnesio;La solución de cultivo de células HA no contiene iones de calcio y magnesio., pero contiene BSA.

Las ventajas del buffer HEPES:

1A diferencia de la PEcina, el HEPES no contiene grupos de coordinación y no puede formar complejos estables con la mayoría de los iones metálicos.

2. El HEPES tiene una muy buena solubilidad en agua y el rango de amortiguación es cercano a neutro.por lo que no es adecuado para sistemas redox y tiene iones relativamente grandesLa fuerza, PIPES es más ácida.

3. El HEPES no tiene efectos tóxicos ni secundarios en las células a baja concentración y puede controlar un rango de pH constante durante mucho tiempo.y el medio de cultivo general contiene 20 mmol/L de HEPES para lograr una capacidad de amortiguaciónPor lo tanto, se utiliza comúnmente en solución de HA, solución de cultivo celular, solución de preservación de virus e incluso productos para el cuidado de la piel.

Entre los amortiguadores biológicos,EPPSyPIPESSon similares en propiedades a HEPES. Se utilizan como amortiguadores para diferentes experimentos, y a veces pueden ser reemplazados entre sí.Tiene más experiencia en la producción y venta de diversos amortiguadores¡Los socios son bienvenidos a visitar y guiar!