Elegir el correctoBiológicosel bufferEn la mayoría de los casos, el experimento puede ser una tarea difícil, ya que hay muchas opciones disponibles (Hepes, Mops, Tris, Bis-Tris, etc.), que pueden causar fácilmente confusión.
Después de comprender estos desafíos, Desheng ha preparado una lista corta para su referencia al elegirel bufferSal para la investigación:
1Rango de amortiguador
Cada reactivo tampón tiene un rango de pH con el más fuerteel bufferEsta capacidad de amortiguador se determina generalmente por la pKa delel bufferDebe elegir un amortiguador con un valor de pKa cercano a la mitad del rango deseado (generalmente se recomienda utilizar unel buffercon un valor de pKa que esté al menos dentro de una unidad de pH del pH objetivo).
El rango de pH aplicable de cada tampón
2. cambios de pH durante el experimento
Considerar de antemano si el valor del pH puede aumentar o disminuir durante el experimento es fundamental para la selección deel buffers. Si cree que el pH aumentará durante el experimento, debe elegir un amortiguador con un pKa ligeramente superior al valor óptimo al comienzo del experimento.si cree que el pH disminuirá, elegir un tampón con un pKa más bajo.
3. Concentración del amortiguador
La concentración de amortiguador debe ajustarse para que tenga una capacidad de amortiguamiento suficiente para el sistema experimental.no se puede estabilizar el pH de la soluciónPor el contrario, si la concentración es demasiado alta, es probable que el amortiguador afecte al experimento.
Para los sistemas en los que el intercambio de protones de hidrógeno no está activo, se recomienda generalmente una concentración de 25-100 mM.el bufferConcentración 20 veces mayor que la concentración molar de los protones intercambiados.
Cuando se prepara unel bufferla solución, recuerde ajustar la concentración de la solución a la concentración de uso prevista.
4Cambio de temperatura
El pH de la solución tampón debe ajustarse según la temperatura a la que se realizará el experimento.y por lo tanto el pH y la capacidad de amortiguación del sistemaEsta situación puede ser crítica en sistemas biológicos, donde se requieren concentraciones precisas de iones de hidrógeno para que el sistema de reacción funcione con la máxima eficiencia.
La pKa de algunos tampones (como PIPES) es menos sensible a los cambios de temperatura, pero otras opciones (comoTRIZLos pacientes que presentan un aumento de los niveles de glucosa en el cuerpo (como los pacientes que presentan una disminución de los niveles de glucosa en el cuerpo, como los pacientes que presentan una disminución de los niveles de glucosa en el cuerpo, como los pacientes que presentan una disminución de los niveles de glucosa en el cuerpo, como los pacientes que presentan una disminución de los niveles de glucosa en el cuerpo, como los pacientes que presentan una disminución de los niveles de glucosa en el cuerpo, como los pacientes que presentan una disminución de los niveles de glucosa en el cuerpo, como los pacientes que presentan una disminución de los niveles de glucosa en el cuerpo, como los pacientes que presentan una disminución de los niveles de glucosa en el cuerpo, son los más afectados por estos cambios.
La figura siguiente muestra el cambio aproximado de pKa según la temperatura de la biobúfera de Desheng:
Cambio aproximado de pKa de la temperatura de la biobúfera de Desheng
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