¿Cómo usted elige los almacenadores intermediarios biológicos para la cromatografía?

La cromatografía se utiliza a menudo para la separación y purificación de proteínas en el laboratorio. En este proceso, las variaciones de pH están relacionadas con la capacidad de separación del sistema.Si el pH del disolvente está cerca de pKa, por ejemplo, pequeños cambios en el PH pueden afectar fuertemente a la retención y, en consecuencia, a los resultados de separación.Dado que la retención de compuestos ionizables es especialmente sensible a la variable PH.

Según la literatura pertinente en cromatografía, se encontró que aunque elBase de Trisy MES son a menudo las mejores opciones para esta técnica, otros amortiguadores también se han utilizado en la cromatografía de intercambio de cationes, cromatografía de intercambio de aniones,cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) y otras técnicas similaresA continuación están los 10 mejores amortiguadores para su referencia.

1) Puertor BIS-TRIS

Rango de pH adecuado: 5,8 - 7.2

PKA (25°C): 6.46

Peso molecular: 209,2 g/mol

Se utiliza como amortiguador durante la cromatografía de intercambio de aniones (preocupaciones: varios componentes en un sistema cromatográfico pueden competir por la unión de metales con este amortiguador)

2) El amortiguador BES

Rango de pH adecuado: 6.4 - 7.8

PKA (25°C): 7.09

Peso molecular: 213,2 g/mol

Se utiliza como amortiguador de unión y eluente en la cromatografía de intercambio catiónico / como amortiguador en la cromatografía de filtración en gel

3) El amortiguador de la bicina

Rango de pH adecuado: 7.6 - 9.0

PKA (25°C): 8 °C.26

Peso molecular: 163,2 g/mol

Se utiliza como amortiguador de fase móvil y como eluente en la cromatografía de intercambio catiónico

4) El colchón CAPS

Rango de pH adecuado: 9.7 - 11.1

PKA (25°C): 10 °C.40

Peso molecular: 221,32 g/mol

Se utiliza como amortiguador de unión y eluente en la cromatografía de intercambio catiónico

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5) El amortiguador HEPES

Rango de pH adecuado: 6.8 - 8.2

PKA (25°C): 7.48

Peso molecular: 238,3 g/mol

Se utiliza como amortiguador de unión y eluente en la cromatografía de intercambio catiónico en un método de diálisis inversa en dos etapas para ensayos de liberación in vitro

6) Puffer de la MES

Rango de pH adecuado: 5,5 a 6.7

PKA (25°C): 6.10

Peso molecular: 195,2 g/mol

Se utiliza como amortiguador en electrocromatografía capilar, cromatografía por filtración por gel, cromatografía por columna de fosfocelulosa, cromatografía por interacción hidrofóbica y cromatografía por intercambio de cationes

7) búfer de los MOPS

Rango de pH adecuado: 6,5 a 7.9

PKA (25°C): 7.14

Peso molecular: 209,3 g/mol

Se utiliza como amortiguador para la purificación de proteínas en cromatografía

8) Puertor de las tuberías

Rango de pH adecuado: 6,1 a 7.5

PKA (25°C): 6.76

Peso molecular: 302,37 g/mol

Se utiliza como amortiguador en la cromatografía de intercambio catiónico, debe utilizarse en concentraciones más bajas debido a su gran resistencia iónica y dependencia de la concentración en pKa.Y un amortiguador en la cromatografía de fosfocelulosa para purificar las proteínas de los microtúbulos

9) Puertor de los TAPS

Rango de pH adecuado: 7.7 - 9.1

PKA (25°C): 8 °C.40

Peso molecular: 243,28 g/mol

Se utiliza como amortiguador en la cromatografía planar para la separación de colorantes y en la cromatografía de intercambio iónico para la purificación enzimática14

10) Puffer de Tris

Rango de pH adecuado: 7.5 - 9.0

PKA (25°C): 8 °C.06

Peso molecular: 121,14 g/mol

Se utiliza como amortiguador y eluente en la cromatografía de intercambio de aniones y en la electrocromatografía capilar debido a su baja movilidad iónica

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