Principio de etiquetado de éster del acridinium del substrato de la quimioluminescencia en reactivo de diagnóstico en immunoensayo de la quimioluminescencia, etiquetamos la proteína del anticuerpo con el éster de la acridina al principio, para poder detectar el analito después de la reacción inmune. En ese caso, cómo etiquetar el anticuerpo es muy crítico. Las sales de la acridina y los compuestos relacionados se han demostrado extensamente ser etiquetas quimioluminescentes muy útiles, superando los radioisótopos en estabilidad, especificidad de la etiqueta, y sensibilidad de la detección. El éster de acridina-NHS, también nombre como éster del succinimide de la acridina, poder reacciona con los grupos aminados primarios de proteínas. Bajo condiciones alcalinas, NHS se substituye como grupo que se va y la proteína forma un enlace estable de la amida con el éster de la acridina. Después de que la reacción fuera terminada, exceso de la sal del acridinium fue quitada a través de una columna que desalaba. En presencia del peróxido de hidrógeno alcalino, acridina-etiquetado las proteínas puede emitir la luz sin catálisis enzimática.
Por lo tanto, la adición de la solución de la excitación hace el sistema de reacción lanzar los fotones aproximadamente 430 nanómetro inmediatamente, y la concentración de la proteína puede ser detectada contando el número de fotones con un luminometer estándar. Porque este proceso de la luminiscencia se termina en el plazo de 2 segundos, la muestra se debe colocar directamente delante del detector del fotón dentro del fotómetro. Las proteínas, los polipéptidos, los anticuerpos, y los ácidos nucléicos se pueden etiquetar todo con los ésteres de la acridina.
Qué se debe observar para el reactivo de la quimioluminescencia está disolviendo el éster del succinimide de la acridina con DMF estrictamente anhydrousstrictly anhidro para evitar que el éster de la acridina sea hidrolizado. Y debe ser almacenada en un sello seco en -20°C cuando es parado. Diferente del éster tradicional de la acridina, la estructura del éster del succinimide de la acridina se ha modificado para aumentar el obstáculo estérico y para aumentar la resistencia de la hidrólisis. Puede ser estable en la solución tampón del pH en la temperatura ambiente con pH 7,0.
Si el ácido carboxílico de la acridina sin - NHS, es necesario añadir un agente de condensación tal como EDCI, etc., para tener una reacción de soldadura con una proteína grupo-que contiene de la amina. La hidrazida de la acridina, conteniendo al grupo amino libre, es conveniente para el empalme directo del ácido nucléico del polisacárido o del grupo con proteínas del aldehino en el extremo de la hidrazida de la acridina.
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