El HEPES es el ácido 4-hidroxietil piperazina etanesulfónico en chino, el número CAS es 7365-45-9, el rango de amortiguación del pH es de 6,8-8.2, el valor de pKa es de 7,5 a 25 °C. HEPES Na es una sal de sodio de n - (2-hidroxietil) piperazina-n'(2-ácido etanesulfónico), su número CAS es 75277-39-3.El buffer HEPESy HEPES Na son amortiguadores biológicos muy importantes, que se utilizan ampliamente en biofarmacéutica, diagnóstico médico y otros campos.
Embalaje de productos de la serie de amortiguadores biológicos
El HEPES es una especie de amortiguador anfótero, que se utiliza en el medio de cultivo celular y la investigación de proteínas para varios tipos de organismos.Kit de extracción de ADN / ARN y kit de diagnóstico de PCRDebido a su efecto no tóxico en las células y a su capacidad para controlar el rango de pH constante durante mucho tiempo, el HEPES se utiliza a menudo como aditivo cosmético, agente activoAgente de peeling y promotor A través del papel del agente.
Diferencia entre HEPES y HEPES Na: HEPES Na, también conocido como base HEPES orgánica, es una relación ácido-base conjugada con HEPES.pero el pH de las dos sustancias después de la disolución es diferente.
Los métodos de preparación de HEPES fueron los siguientes:
Sobre la preparación de la solución tampón de HEPES, según el uso de la preparación, uno es HEPES puro + NaOH, el otro es HEPES + sal.
1、 Preparación de 500 ml de 1 m HEPES, pH = 7.0, solución de base
Disolver 119,15 g de HEPES en 400 ml de agua destilada, añadir 0,5 a 1 m de solución acuosa de NaOH para ajustar al menos el pH requerido (el rango de pH efectivo de HEPES es de 6,8 a 8,2),luego fijar el volumen a 500 ml con agua destilada y conservar a 4 °C.
2、 HEPES fórmula tampón con una pequeña cantidad de sal (500 ml)
HEPES 6,5 g, NaCl 8,0 g, na2hpo 4,7 h2o 0,198 g, ajustar el valor del pH con 0,5 m de solución de NaOH y finalmente fijar el volumen.
3、 Preparación de una solución de sal tampón 2 × HEPES
Se disuelven 1,6 g de NaCl, 0,074 g de KCl, 0,027 g de na2hpo4,2 h2o, 0,2 g de dextrán y 1 g de HEPES en 90 ml de agua destilada, se ajusta al valor de pH requerido con 0,5 m de NaOH,y luego fijar el volumen a 100 ml con agua destilada.
El método de preparación de HEPES Na fue el siguiente:
El HEPES Na puede sintetizarse mediante 4-hidroxietil piperazina y sulfonato de vinilo de sodio, o mediante síntesis a alta presión de ácido hidroxietil sulfónico, hidróxido de sodio y 4-hidroxietil piperazina.En la actualidad, el método de preparación más utilizado que satisface los requisitos de amortiguadores biológicos es la reacción de HEPES con NaOH para producir HEPES Na. Los pasos específicos de preparación son los siguientes:
Bajo protección de nitrógeno, se reaccionó HEPES con pureza entre el 90-99% y NaOH sólido o solución durante 0,2-1 horas a 20-100 °C. Después de la reacción, el producto obtenido se decoloró,filtrado, concentrado, deshidratado, cristalizado, lavado y secado para obtener HEPES Na.
Este método es simple y fácil de operar, y el rendimiento y la pureza del producto HEPES Na son altos, lo que puede cumplir con los requisitos de pureza del amortiguador biológico.
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