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Comparison of chemiluminescence and fluorescent substrates of HRP in enzyme-linked immunoassay

2021-01-26
Comparison of chemiluminescence and fluorescent substrates of HRP in enzyme-linked immunoassay

La preparación enzimática más comúnmente utilizada en el inmunoensayo ligado a enzimas es la peroxidasa del rábano horseradish HRP. Hay tres tipos de sustratos en la detección bioquímica, y hay principalmente tres tipos,Es decir, sustratos cromógenos como:Los TOOSLos substratos, los substratos quimioluminiscentes como el luminol. Entre ellos, los substratos de quimioluminiscencia también se utilizan en el análisis de quimioluminiscencia,que se está volviendo cada vez más popular.


Ya se trate de un sustrato cromogénico, un sustrato fluorescente o un sustrato quimioluminiscente, se utiliza como método de etiquetado y detección,que desempeña un papel clave en la exactitud y sensibilidad del resultado de la detecciónEl más popular es el análisis de inmunidad por quimioluminiscencia.


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polvo de luminol


El desarrollo de diferentes sustratos en ensayos bioquímicos:


En términos del tiempo de desarrollo del método de detección, el sustrato fluorescente es el producto de la peroxidasa desarrollada después del sustrato cromogénico,y la sensibilidad de detección es superior a la del sustrato cromogénicoSe pueden utilizar varios materiales fluorescentes de diferentes colores al mismo tiempo. , pero el equipo es caro, el costo de detección es alto, y es fácilmente interferido por la autofluorescencia generada por células u otras moléculas,y es sensible a la luz e inestable durante la observación y el almacenamientoDespués de los sustratos fluorescentes, el descubrimiento de sustratos quimioluminiscentes similares al luminol llevó a los sustratos HRP de la peroxidasa del rábano picante a una etapa de desarrollo rápida.y varios sustratos quimioluminiscentes muy enriquecidos con peroxidasa de rábano picante Aplicaciones.


La diferencia entre quimioluminiscencia y fluorescencia:


La quimioluminiscencia es diferente de la fluorescencia, es decir, la energía química generada en el proceso de reacción química se absorbe para estimular las moléculas y emitir luz.La fluorescencia es la luz emitida por absorción de energía luminosa para excitar moléculasEsta es la quimioluminiscencia y la diferencia en la fluorescencia radica en las diferentes formas de energía de excitación que forman moléculas excitadas entre las dos.Una es energía química y la otra es energía luminosa.La detección por quimioluminiscencia tiene una alta sensibilidad y un bajo fondo, por lo que se utiliza ampliamente.


Actualmente hay varios sustratos quimioluminiscentes comunes, incluidos los luminoles, peroxioxalatos y ésteres de acridina.reactivos quimioluminiscentesLos productos químicos que se utilizan en el análisis y determinación de sustancias químicas se utilizan comúnmente en el análisis y determinación de sustancias químicas, en el monitoreo ambiental, etc. El campo también tiene aplicaciones importantes.Los reactivos de quimioluminiscencia mencionados anteriormente son especialmente producidos por Desheng, pero hay que tener en cuenta que los ésteres de acridina pueden emitir luz directamente y no requieren catalización enzimática.