Siempre añadimos soluciones tampón al realizar la electroforesis del ADN. Las soluciones tampón más utilizadas incluyen TAE, que contiene Tris, acetato y EDTA, y TBE (Tris-borato-EDTA).
¿Cuál es el papel del amortiguador? Una de las funciones del amortiguador es mantener el pH de la solución estable.se produce una reacción de oxidación en el ánodo para generar iones de oxígeno e hidrógenoEn el caso de las moléculas de hidrógeno y hidróxido, se produce una reacción de reducción en el cátodo para generar iones de hidrógeno e hidróxido.Un buen sistema de amortiguación debe tener una fuerte capacidad de amortiguación para mantener el pH de la solución básicamente estable en ambos polosOtra función del amortiguador de electroforesis es hacer que la solución tenga una cierta conductividad para facilitar la migración de moléculas de ADN.El ADN es una sustancia alcalina que se carga negativamente durante la electroforesis (pH tampón = 8) y migra desde el electrodo negativo al electrodo positivo.
Otro componente del amortiguador de la electroforesis es el EDTA, cuyo propósito es quelar el plasma Mg2+ e impedir la activación de la DNasa durante la electroforesis.El EDTA puede mantener estos iones firmemente para evitar la degradación del ácido nucleicoPero hay que tener en cuenta que los iones de magnesio son también cofactores de muchas enzimas, como las enzimas de restricción, las polimerasas de ADN, etc.por lo que la concentración de EDTA generalmente no es demasiado alta (generalmente alrededor de 1mM).
El DeshengPuertor TRISembalaje
Así que, ¿cuál es mejor, TAE o TBE? De hecho, ¿cuál debería usar para la electroforesis de ADN? Depende del propósito de su experimento.
1La conductividad del TBE es mayor que la del TAE. Por lo tanto, en comparación con el TAE, es menos probable que el TBE cause sobrecalentamiento en el tanque de electroforesis.Se recomienda TBE para electroforesis a largo plazo.
2El ácido bórico es un inhibidor de la enzima, por lo que si necesita separar el ADN por electroforesis para la reacción de digestión, se recomienda utilizar TAE como solución tampón de electroforesis.
3Para fragmentos menores a 300bp, la velocidad de migración en TBE es más rápida en un gel de agarosa del 2%.
4El TAE es adecuado para la separación de fragmentos grandes. Los fragmentos de más de 2kb migran más rápido en TAE (en 0,8% de gel de agarosa), y la velocidad es aproximadamente un 10% más rápida que en TBE.TAE es más adecuado para la recuperación de fragmentos de ADNEn comparación con TBE, TAE tiene una mayor resolución para el ADN superenrolado.
En resumen, no se puede generalizar la cuestión de si TBE o TAE es mejor.El amortiguador biológico desarrollado por Desheng tiene un amplio rango de amortiguador, y sólo este tipo de amortiguador se utiliza. El sistema puede preparar amortiguadores con un amplio rango de valores de pH, y puede proporcionar varias especificaciones de embalaje.Bienvenido a consultar y comprar.
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