La determinación del ácido graso libre (AFC) en suero es un importante índice de ensayo bioquímico y el AFC está estrechamente relacionado con la salud humana.Porque los componentes del suero son complejos y hay muchos tipos de FFA, la detección se ve afectada por muchos factores, por lo que el sustrato cromogénicoLas partes superioresse utiliza generalmente para determinar la FFA.
Reactivo TOPS de sustrato de cromógeno
Para la determinación de los TOPS del cromógeno, los pasos FFA:
1En el recipiente, añadir primero la solución tampón pesada de acuerdo con la proporción de la fórmula, y luego añadir ATP, coenzima A, 4-aminoantipirina, activador iónico (cloruro de magnesio), estabilizador (BSA),y conservante en secuenciaDespués de añadir la cantidad adecuada de agua, añadir el surfactante, ajustar el pH a pH 6-9 con ácido clorhídrico concentrado, añadir acil-CoA sintasa por último, luego mezclar y filtrar,y añadir agua destilada al filtrado para obtener el reactivo A cuantitativamente.
2. Añadir tampón al recipiente, luego añadir cromógeno TOPS, agua, surfactante a su vez, ajustar el pH a pH 6-9, finalmente añadir HRP y acetil CoA oxidasa, luego mezclar y filtrar,y luego añadir agua destilada al filtrado resultante hasta una cantidad cuantitativa se obtiene el reactivo B.
3. Rellenar los reactivos anteriores en viales y conservarlos a 2-8°C. Tomar el reactivo A y la muestra y mezclarlos en una cierta proporción, incubar durante un cierto período de tiempo,y leer el valor de absorción A1; añadir el reactivo B y mezclar uniformemente, incubar durante un cierto período de tiempo y leer el valor de absorbancia A2.
Prepara el amortiguador:
En un recipiente de vidrio limpio, añadir primero el tampón HEPES (tampón de Good, tampón zwitteriónico, incluidos HEPES, Tris, MES, MOPS, etc.) pesado de acuerdo con la proporción de la fórmula,añadir la cantidad adecuada de agua, y luego añadir el surfactante 5 ml/ L TritonX-100, utilizar ácido clorhídrico concentrado para ajustar el pH a pH 6-9, la cantidad es de aproximadamente 5 ml/ L, luego revuelva y filtre,y luego añadir agua destilada al filtrado obtenido hasta una cantidad cuantitativa.
El método de uso de TOPS comoSubstrato cromogénicopara la detección de FFA en suero o plasma tiene una alta precisión y un pequeño error de medición, y es el color más adecuado entre los muchos cromógenos de Trinder, que es bajo en acetil CoA, alto en estabilidad,y grande en el coeficiente de absorción molarAdemás de TOPS, los sustratos cromogénicos producidos por Desheng incluyen TOOS, MAOS, ADPS, etc., que son adecuados para la detección del azúcar en la sangre y otros indicadores bioquímicos.
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