En el campo del diagnóstico in vitro, tanto el ensayo inmunológico por quimioluminiscencia CLIA como el análisis de inmunofluorescencia IFA son métodos de detección comúnmente utilizados,y finalmente ambos son detectados por un fotómetro, pero los principios de los dos son esencialmente diferentes.
En comparación con el ensayo radioinmunológico, el ensayo inmunológico por fluorescencia y el ensayo inmunológico ligado a enzimas, el ensayo inmunológico por quimioluminiscencia tiene más ventajas.alta especificidadAdemás, el marcador no contiene radiación, tiene un largo período de validez y puede ser totalmente automatizado.
Reactivo de quimioluminiscencia, éster de acridinio
La diferencia entre inmunidad por quimioluminiscencia y inmunidad por fluorescencia:
Aunque ambas son reacciones de luminiscencia, la diferencia más intuitiva es que la quimioluminiscencia es la propia luminiscencia del reactivo,mientras que la fluorescencia es irradiada con una fuente de luz (generalmente ultravioleta) y luego emite luzEl principio de emisión de luz de los dos es diferente, por lo que los resultados de detección también serán diferentes.
La quimioluminiscencia es el uso de la energía generada por una reacción química para inducir transiciones de nivel de energía para emitir luz, como el luminol que detecta manchas de sangre.La fluorescencia es un fenómeno de fotoluminiscencia, y se debe proporcionar una fuente de luz para excitar moléculas para producir transiciones de nivel de energía, y luego emitir luz.
La quimioluminiscencia es menos interferente que la inmunidad a la fluorescencia:
Cuando estos dos métodos se utilizan para el análisis inmunológico, la diferencia es obvia: la quimioluminiscencia no requiere una fuente de luz externa y la interferencia de fondo es pequeña;mientras que la fluorescencia requiere una fuente de luz externaCuando se detecta en la dirección de la fuente de luz vertical, la proteína, los aminoácidos y otras moléculas en la muestra biológica también se detectarán.y el fondo es ligeramente más altoEs necesario seleccionar reactivos fluorescentes adecuados y métodos de procesamiento de muestras para reducir la influencia de la adsorción no específica de las proteínas.
En el método directo, el anticuerpo de cada antígeno debe ser marcado fluorescentemente, y el marcado fluorescentemente puede afectar el título del anticuerpo o incluso ser inválido.El método indirecto sólo necesita hacer el anticuerpo correspondiente al antígeno correspondienteNo es necesario que se etiquete fluorescentemente para cada anticuerpo, y tiene poco efecto en el título del anticuerpo primario.La interferencia de la quimioluminiscencia es muy pequeña y la especificidad es muy alta.El uso de todo el método se ve limitado por la no especificidad del análisis químico en sí.El desarrollo de materiales de perlas magnéticas ha hecho que el desarrollo de la tecnología de quimioluminiscencia sea cada vez más maduro.
En el desarrollo de reactivos de diagnóstico in vitro, Desheng ha logrado el éxito tanto en reactivos de inmunoensayo vinculados a enzimas como en reactivos de quimioluminiscencia. el luminol y el isoluminol son todos los reactivos necesarios en los ensayos inmunológicos de quimioluminiscencia. .
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