TES: el "guardián estable" en la precipitación y extracción del ADN

En los experimentos de biología molecular, la precipitación y extracción del ADN son pasos fundamentales en la investigación de genes, la tecnología de clonación y el desarrollo de reactivos de diagnóstico.la selección deAgentes de amortiguación biológicosafecta directamente la pureza, la integridad y la eficiencia experimental del ADN.Ácido trimetilmetilaminoetanosulfónico (Puertor TES), como agente de amortiguación eficiente, ha demostrado ventajas significativas en el campo de la manipulación del ADN debido a sus propiedades físicoquímicas y su estabilidad únicas.

Las propiedades químicas del TES: base científica para la capacidad de amortiguación

TES, El nombre químico es ácido 2- [trihidroximetil) metilamino] -1-etanosulfónico,y los grupos de ácido sulfónico y múltiples grupos hidroxilo en su estructura molecular le dotan de una excelente capacidad de amortiguaciónA temperatura ambiente, el valor de pKa de TES es 7.5, y el rango de amortiguación eficaz cubre un pH de 6,8-8.2En comparación con el buffer Tris tradicional (rango de pH de buffer 7,0-9,0),El TES muestra una mayor resistencia a los cambios de temperatura y puede evitar eficazmente el riesgo de degradación del ADN inducida por bajas temperaturas.

El triple papel central en la extracción de ADN

1Lísis celular y eliminación de proteínas

Durante la fase de lisis celular, el TES inhibe la actividad de las enzimas del ADN y protege el ADN genómico de la degradación mediante el quelado de iones metálicos divalentes (como Mg 2 +, Ca 2 +) en la solución.Su sistema tampón mantiene simultáneamente el pH óptimo para las proteasas como la proteasa K (generalmente pH 7.5-8.0), acelerando la descomposición de las membranas celulares y la degradación de las proteínas.Los experimentos han demostrado que la eficiencia de eliminación de proteínas del sistema de lisis utilizando tampón TES se mejora en aproximadamente un 25% en comparación con los métodos tradicionales, sentando una buena base para las siguientes etapas de purificación.

2Regulación selectiva de la precipitación del ADN

TES es una solución de amortiguador compuesta de ácido clorhídrico Tris, EDTA y SDS (TES-EDTA-SDS), que logra la precipitación selectiva de ADN mediante el ajuste de la resistencia iónica de la solución.Con altas concentraciones de sal (como 2.5M NaCl), los grupos de ácido sulfónico de los TES actúan a través de un blindaje electrostático, promoviendo la repulsión de los grupos fosfatados entre las moléculas de ADN y formando un estado soluble;Cuando la concentración de sal cae por debajo de 0Este proceso tiene un efecto repulsivo sobre el ARN y otras impurezas, lo que resulta en una pureza de recuperación del ADN superior al 95%.

3Protección de la actividad enzimática

El efecto protector del amortiguador TES sobre la actividad enzimática es particularmente prominente en la limitación de las reacciones de escisión enzimática.La investigación ha demostrado que la eficiencia de corte de las enzimas de restricción (como EcoRI) utilizando el sistema de reacción TES es 18% -22% superior a la del búfer HEPESSu ambiente de pH estable reduce los cambios de conformación enzimática, prolonga el período lineal de las reacciones de escisión enzimática y garantiza la precisión de los experimentos de edición génica.

Conclusión

El tampón TES presenta ventajas insustituibles en la precipitación y extracción de ADN debido a su excelente estabilidad del pH, propiedades de quelación de iones metálicos y efecto protector enzimático.Al optimizar las condiciones experimentales y explorar nuevos escenarios de aplicación, el TES seguirá impulsando la investigación en biología molecular hacia direcciones más eficientes y precisas.El dominio del mecanismo de amortiguación y las técnicas de aplicación de TES es sin duda la clave para mejorar la tasa de éxito de los experimentos.

El tampón TES no solo se utiliza en cosméticos, sino que sus propiedades de tampón le hacen desempeñar un papel importante en el análisis de proteínas, determinación de la actividad enzimática y cultivo celular.Puertor TES, Desheng puede proporcionar alta pureza y diversos tipos de materias primas tampón. Los clientes pueden completar la adquisición de una sola parada, ahorrando tiempo y costos. Si usted tiene alguna intención relevante,Siéntase libre de contactarnos para la compra en cualquier momento!