Uso de CAPS (CAS 1135-40-6) en el experimento de la transmembrana de la proteína

Introducción

CapítulosEl ácido 3- ((ciclohexilamina) 1-propanesulfónico, un químico orgánico, polvo cristalino blanco, CAS1135-40-6, es un amortiguador biológico, comúnmente utilizado en kits de diagnóstico bioquímico,Los kits de extracción de ADN/ARN y los kits de diagnóstico por PCREl amortiguador para la química enzimática y la separación HPLC de fármacos básicos se utiliza ampliamente en el proceso de transferencia de membrana de secuenciación de proteínas.Capítulosel amortiguador está compuesto por:CapítulosEl pH de la fibronectina se ajusta a 11,0 para la purificación de fibronectina.

Puertor de las CAPS

Puntos clave de funcionamiento

1. Electróforesis SDS-PAGE: según las condiciones convencionales (sistema CAPS: para proteínas > = 20 kD; sistema Tris Tricine: para proteínas de bajo peso molecular, también para proteínas de alto peso molecular);

2. Concentración de metanol: el rango de concentración de metanol en el tampón de electroimpresión CAPS es del 0 al 20% (la concentración de metanol es alta, se utiliza para la transferencia de proteínas de bajo peso molecular;La concentración de metanol es baja o no contiene metanol., utilizado para la transferencia de proteínas de alto peso molecular);

3Tratamiento de la membrana de PVDF: extraer la membrana de PVDF, remojarla en metanol durante varios segundos y luego colocarla en el tampón de electroblot de CAPS (Nota:se evitará que la membrana del PVDF se seque después del funcionamiento. Si la membrana está seca, se repite la operación de este paso);

4. Tratamiento con gel: extraer el gel y remojarlo en el tampón CAPS durante 5 a 10 minutos. (Nota: este paso puede omitirse cuando se transfieren algunas proteínas básicas fuertes PI > 9.0);

5. Instalar la ranura de transferencia: sumergir el papel filtro y la esponja en el tampón de electro blotting, luego presionar el sándwich de impresión eléctrica en el orden de esponja, papel filtro, película PVDF, gel,Papel filtrante y esponja, y ponerlo en una pequeña ranura eléctrica rotativa.

6Condiciones de transferencia: transferencia a presión constante de 50 V (100-170 MA) a temperatura ambiente durante 0,5 a 2 h. (Nota: drenar las burbujas entre el gel y la película PVDF.la proteína superior a 70 KD debe transferirse durante más tiempo);

7- Pretratamiento de la membrana de PVDF: extraer la membrana de PVDF y enjuagarla con agua desionizada, remojarla en metanol durante varios segundos, y luego teñirla;

8. Tintura por membrana: Tintura azul brillante Coomassie (dissolver el R-250 azul brillante Coomassie al 0,1% en 40% de metanol/1% de ácido acético) durante 30-50 segundos (no más de 1 minuto),decolorante con metanol al 50% (cambia frecuentemente la solución decolorante), lavar completamente con agua desionizada y luego secar;

C. LasEl APS preparación de amortiguadores

1. 10×CAPS ((100 mmol/L) solución tampón se prepara de la siguiente manera: CAPS, 22.13 g; añadir agua desionizada a 900 ml; ajustar el valor del pH a 11.0 con 2 mol/L NaOH (aproximadamente 20 ml), luego diluir a 1 L, y almacenar a 4°C.

2El tampón de electroimpresión CAPS (1 × CAPS que contiene 10% de metanol) se prepara mediante los siguientes métodos: 200 ml de 10 × CAPS; 200 ml de metanol; 1600 ml de agua desionizada.

Otras aplicaciones

CapítulosTambién se utiliza para la fabricación de materiales de soldadura, equipos de aire acondicionado y materias primas para la fabricación; también se utiliza para la fabricación de productos pirotécnicos; se utiliza como reactivo analítico,portador de intercambiadores de calor, y también se utiliza en la industria farmacéutica; se utiliza para aire acondicionado, pirotecnia, baterías secas; también se utiliza como flujo y desecante;se utiliza para curar isocyanato acuoso en la industria de la pinturaLa empresa Desheng se especializa en I + D y producción de diversos amortiguadores biológicos, incluidos CAPS, Tris, Bicine, MOPS, etc., con alta pureza ≥ 99%, proceso estable,Acoger a las empresas y a los particulares a una mayor consulta.