Uso de CAPS (CAS 1135-40-6) en el experimento de la transmembrana de la proteína

Introducción

CAPS, 3 (ciclohexilamina) - 1-propanesulfonic ácido, una sustancia química orgánica, polvo cristalino blanco, CAS1135-40-6, es un almacenador intermediario biológico, de uso general en equipos de diagnóstico bioquímicos de los equipos, de la extracción de DNA/RNA y los equipos del diagnóstico de la polimerización en cadena. El almacenador intermediario para la química de enzima y la separación de la CLAR de drogas básicas es ampliamente utilizado en el proceso de la transferencia de la membrana de la secuencia de los proteus. CAPS protege se compone de CAPS, del agua desionizada, del etc., y su pH se ajusta a 11,0 según fibronectin del purificationof.

CAPS protege

Puntos claves de la operación

1. Electroforesis de SDS-PAGE: según las condiciones convencionales (sistema de CAPS: para > = proteína 20kD; Sistema de Tris Tricine: para la proteína de poco peso molecular, también para la proteína de molecularidad elevada del peso);

2. Concentración del metanol: la gama de concentración del metanol en el almacenador intermediario electroimprinting de CAPS es 0-20% (la concentración del metanol es alta, utilizado para la transferencia de poco peso molecular de la proteína; la concentración del metanol es baja o aún no contiene el metanol, usado para la transferencia de molecularidad elevada de la proteína del peso);

tratamiento de la membrana 3.PVDF: saque la membrana de PVDF, empápela en el metanol por varios segundos, y después póngala en el almacenador intermediario electroblotting de CAPS. (Nota: la membrana de PVDF será prevenida de secarse después de la operación. Si la membrana es seca, repita la operación de este paso);

4. Tratamiento del gel: quite el gel del gel y empápelo en el almacenador intermediario de CAPS por 5-10 minutos. (Nota: este paso puede ser omitido al transferir algunas proteínas básicas fuertes pi > 9,0);

5. Instale la ranura de la transferencia: sumerja el papel y la esponja de filtro en el electro almacenador intermediario que borra, después presione el bocadillo de impresión eléctrico en el orden de la esponja, del papel de filtro, de la película de PVDF, del gel, del papel de filtro y de la esponja, y póngalo en una pequeña ranura rotatoria eléctrica.

6. Condiciones de la transferencia: transferencia en la presión constante 50V (100-170 mA) en la temperatura ambiente para 0.5-2h. (Nota: drene las burbujas entre el gel y la película de PVDF. Por ejemplo, la proteína sobre 70 KD se debe transferir por un tiempo más largo);

7. Tratamiento previo del teñido de la membrana de PVDF: saque la membrana de PVDF y aclárela con agua desionizada, empápela en el metanol por varios segundos, después téñala;

8. Teñido de la membrana: Azul brillante de Coomassie que teñe (disuelva 0,1% azules brillantes R-250 de Coomassie en ácido acético del 40% el methanol/1%) por 30-50 segundos (no más que 1 minuto), decolorando con el metanol del 50% (solución de descoloración del cambio con frecuencia), lavándose con agua desionizada completamente, y después secándose;

Preparación de CAPSbuffer

1. 10×CAPS (100mmol/L) se prepara la solución tampón como sigue: CAPS, 22.13g; añada el agua desionizada a 900ml; ajuste el valor de pH a 11,0 con NaOH 2mol/L (sobre 20ml), después dilúyalo a 1L, y almacénelo en 4℃.

2. El almacenador intermediario electroimprinting de CAPS (1×CAPS que contiene el metanol del 10%) es preparado por los métodos siguientes: 200ml 10 del × CAPS; 200ml del metanol; 1600ml del agua desionizada.

Otros usos

CAPS también se utiliza para fabricar los materiales de soldadura, el equipo de aire acondicionado y las materias primas para fabricar; también se utiliza para fabricar la pirotecnia; se utiliza como reactivo analítico, portador del intercambio de calor, y también se utiliza en industria farmacéutica; se utiliza para el aire acondicionado, pirotecnia, baterías secas; también se utiliza como flujo y desecante; se utiliza para el agente endurecedor del isocianato acuoso en industria de pintura. La compañía de Desheng se especializa en el R&D y la producción de diversos almacenadores intermediarios biológicos, incluyendo CAPS, Tris, Bicine, las FREGONAS, el etc., con el ≥ el 99% de la pureza elevada, el proceso estable, las empresas agradables y los individuos a la consulta adicional.