Noticias de la compañía Aplicación del amortiguador biológico BES en la cromatografía de filtración por gel
La cromatografía de filtración por gel, también conocida como cromatografía de tamiz molecular o cromatografía de exclusión estérica, es una tecnología de separación basada en las diferencias de tamaño molecular.En la investigación de bioquímica y biología molecularLa cromatografía de filtración por gel se utiliza ampliamente en la separación y purificación de macromoléculas biológicas como proteínas y péptidos.amortiguador biológicoEn este documento se analizará la aplicación y la importancia de laPuertor del BESen la cromatografía por filtración en gel.
Principios básicos de la cromatografía por filtración en gel
El principio de la cromatografía de filtración por gel se basa principalmente en la difusión y detección de moléculas en partículas de gel.las moléculas de diferentes tamaños se bloquearán en diferentes gradosDebido a su gran diámetro, las sustancias macromoleculares no son fáciles de penetrar en los poros de las partículas de gel, por lo que se mueven hacia abajo a lo largo de la brecha entre las partículas de gel.La velocidad de migración es rápida., y la trayectoria es corta, por lo que fluyen fuera de la columna cromatográfica primero; Además de la difusión en el espacio entre las partículas de gel,Las moléculas pequeñas también pueden entrar en los microporos de las partículas de gelDurante el movimiento descendente, pequeñas moléculas se difunden de una partícula de gel a la brecha entre las partículas y luego entran en otra partícula de gel.constantemente entran y difundenLa velocidad de movimiento descendente de las moléculas pequeñas está por detrás de la de las moléculas grandes, de modo que las moléculas grandes de la muestra salen primero de la columna cromatográfica.Las moléculas medias fluyen más tarde.Este fenómeno también se llama fenómeno de tamiz molecular.
Características del amortiguador del BES y su papel en la cromatografía de filtración por gel
BES, como agente de amortiguación zwitteriónica, tiene un excelente rendimiento de amortiguación y biocompatibilidad. Puede absorber o liberar protones (H +) de manera efectiva dentro de un amplio rango de pH (generalmente 6.0 ~ 8.5),manteniendo así la estabilidad relativa del pH de la soluciónEsta característica hace de BES un regulador ideal del pH en experimentos bioquímicos.
En la cromatografía de filtración por gel, el papel principal de BES es mantener la estabilidad del valor del pH de la solución.Debido al hecho de que la función y la actividad de muchas biomoléculas dependen de ambientes de pH específicos, es crucial mantener un valor de pH estable de la solución durante los procesos de separación y purificación.puede absorber o liberar protones para hacer frente a pequeños cambios en el pH en la solución, garantizando así la estabilidad y actividad de las biomoléculas durante el proceso de separación.
Además, el BES también puede ajustar la resistencia iónica de la solución.Al ajustar la concentración de BES, se puede controlar la fuerza iónica de la solución, afectando así a la velocidad de elución y a la eficiencia de separación de las proteínas.La fuerza iónica adecuada puede mejorar la interacción entre las partículas de proteína y gel, prolonga el tiempo de elución de la proteína y mejora la eficiencia de la separación.
Aplicación del BES en la cromatografía de filtración por gel
1. Optimizar las condiciones de separación
Cuando se utilice la cromatografía de filtración por gel para separar y purificar las biomacromoléculas,Es necesario seleccionar las condiciones de separación adecuadas de acuerdo con las características de las moléculas diana y las necesidades experimentales.BES, como solución tampón, puede optimizar las condiciones de separación ajustando parámetros como la concentración, el valor del pH y la resistencia iónica.El aumento de la concentración de BES y la reducción del valor del pH pueden mejorar su interacción con las partículas de gel y mejorar la eficiencia de separación.
2Mejorar la pureza de la separación
Dado que la cromatografía de filtración por gel se basa en el tamaño molecular, puede haber algunas moléculas de impurezas de tamaño similar a las moléculas objetivo en el proceso de separación.Estas moléculas de impurezas pueden competir con las moléculas diana para los sitios de adsorción de las partículas de gelAl utilizar el BES como solución tampón, se puede ajustar la resistencia iónica y el valor del pH de la solución,para cambiar la interacción entre las moléculas diana y las moléculas de impurezas y las partículas de gel y mejorar la pureza de separación.
3Proteger la estructura y la función de las biomoléculas
En el proceso de cromatografía por filtración por gel, la estructura y función de las biomacromoléculas pueden verse afectadas por factores físicos y químicos.puede proporcionar un ambiente de pH estable y adecuado para proteger la estructura y función de las biomoléculas de ser afectadasAdemás, el BES también puede unirse con algunos iones metálicos para formar complejos de iones metálicos estables, evitando así el efecto destructivo de los iones metálicos en las biomoléculas.
Conclusión
En conclusión, el amortiguador biológico BES tiene un amplio valor de aplicación en la cromatografía de filtración por gel.Las condiciones de separación pueden optimizarse, la eficiencia y pureza de la separación pueden mejorarse y la estructura y la función de las biomoléculas pueden protegerse.
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