Ácido etanosulfónico de 4-hidroxietilpiperazina, abreviatura en inglésEl buffer HEPES, número CAS: 7365-45-9, color es polvo cristalino blanco, el rango de valores de pH es de 6,8-8.2, su aplicación más común es como un valor de pH de ajuste de amortiguador biológico y su aplicación en productos para el cuidado de la piel también son amados por los principales fabricantes.Su aplicación en la detección del virus de la rabia es a menudo desconocida.Hoy, el editor de Desheng popularizará el conocimiento relevante para todos.
El virus de la rabia generalmente no produce citopatía (CPE) cuando se reproduce en células infectadas, y no es fácil formar placas en condiciones de cultivo convencionales.Aunque muchos estudiosos en el país y en el extranjero han establecido la erosión del virus de la rabia en las células embrionarias de gallinas y las células BHK-21Los métodos puntuales, pero estos métodos requieren condiciones experimentales estrictas, o las operaciones son complicadas y difíciles de dominar, lo que afecta a su popularización y uso.Después de que los investigadores descubrieron que el ácido 4-hidroxietilpiperazina etanesulfónico HEPES puede aumentar el efecto patógeno del virus de la rabia en las células infectadas, utilizaron esta característica del HEPES para establecer un método de placa HEPES simple y rápido para el virus de la rabia.
Efecto del HEPES en la formación de placa del virus de la rabia
Después de que las células infectadas fueron cultivadas a 37°C durante 3 a 5 días, las células infectadas tratadas con HEPES desarrollaron cambios citopáticos evidentes en la parte inferior de la cubierta.Después de teñido con cristal violetaEn el grupo de células infectadas no tratadas con HEPES no se observaron signos de formación de placa, no se observó ningún efecto citopático ni formación de placa.Se puede ver que el HEPES puede promover obviamente la formación de placa del virus de la rabia en las células BHK..
Observación sobre la sensibilidad del método HEPES de la placa
El método de la placa HEPES se puede utilizar para el título de la infección por virus.Los experimentos muestran que existe una relación obvia entre el número de placas formadas después de la infección por el virus y la dilución del virus.Los títulos infecciosos de la misma cepa del virus de la rabia CTN-BHK se midieron mediante el método de la placa HEPES y el método del ratón.Los resultados mostraron que el número de placas obtenidas por el método HEPES para 4 determinaciones consecutivas osciló entre 1 y.0×10° a 4.0×10*PFU/m1. El título de infección obtenido por el método del ratón para 4 determinaciones consecutivas es de 6.0×6.8log o 1.0×10°×6.3×10/ml.Esto demuestra que el método HEPES rápido de la placa tiene la misma sensibilidad que el método del ratón..
Ventajas del método HEPES de la placa
Utilizando la cepa del virus de la rabia CTN-181 y la cepa CTN-BNK para estudiar el método de titulación del título de la infección,los resultados muestran que el HEPES puede inducir y aumentar el efecto patógeno del virus canino en las células infectadasCuando el virus infecta las células, se cultivan a 37 °C durante 3 ̊5 Sólo añadir 50 ̊00mmol/L HEPES en la cubierta de medio semi-sólido de metilcelulosa en el primer día,mancha con solución cristalina violeta después de 24 horas, y calcular el número de placas a simple vista después de secar a temperatura ambiente.Este método de placa tiene las ventajas de, simple, económico, sensible y fácil de dominar.
El HEPES producido por Desheng es de grado reactivo con una pureza superior al 99%.El DeshengSi tiene alguna pregunta o necesidad, puede ir al sitio web oficial para consultar al personal de servicio al cliente.
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