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¡El éster de la acridina puede detectar el daño de la DNA causado por el formaldehído y el acetaldehído!

2021-03-04
¡El éster de la acridina puede detectar el daño de la DNA causado por el formaldehído y el acetaldehído!

Los diversos factores exógenos y endógenos, tales como agentes contaminadores ambientales, radiación ionizante, quimioterapia de la droga, y metabolismo de la célula, pueden causar diversas formas de daño de la DNA. Entre ellos, las roturas del doble-filamento de la DNA tienen la mayoría del daño grave a la estabilidad del genoma y pueden amenazar a la supervivencia de células. Estableciendo un simple, el método rápido y sensible para detectar efectos del hibridación y de la genotoxicidad de la DNA es un tema de investigación muy significativo. Aquí está una breve introducción al método de detección del daño de la DNA.

 

Cuáles son los tipos de detección del daño de la DNA

Los métodos de detección del daño de la DNA incluyen la espectrofotometría del electroforesis del gel, ultravioleta, la fluorescencia y la electroquímica, y el análisis de la quimioluminescencia. El análisis de la quimioluminescencia (CL) ha sido ampliamente utilizado en los campos del ambiente y de las ciencias de la vida debido a su alta sensibilidad, la gama linear ancha, la operación conveniente, el análisis rápido, y la automatización fácil. El formaldehído y el acetaldehído son ambos agentes contaminadores ambientales. Hasta cierto punto, puede estropear la DNA. Estudie la cantidad de ésteres del acridinium integrados en la DNA antes y después del daño del formaldehído y del acetaldehído, causando cambios en la intensidad de la quimioluminescencia de los ésteres del acridinium, y estudie el comportamiento del daño del formaldehído y del acetaldehído en la DNA. Establezca un método de análisis simple de la quimioluminescencia para evaluar el grado de daño de la DNA causado por el formaldehído y el acetaldehído.

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Método de los ésteres de la acridina para detectar daño medioambiental a la DNA

1. Primero, empape la célula de cristal de la luminiscencia usada en una determinada cantidad de ácido nítrico concentrado por varias horas, acidifique, y después aclárela con agua. Añada el μL 20 de la DNA del timo del becerro 1mg/mL a la célula acidificada de la luminiscencia, y póngalo para que 1 hora haga La DNA se fija por adsorción en la parte inferior de la piscina luminescente, y entonces el becerro unadsorbed que la DNA del timo se lava con agua secundaria para obtener la piscina luminescente con la DNA fijó por adsorción.

 

2. Añada 50μL del éster del acridinium 9.6×10-7g/mL a la célula luminescente, y la reacción del chimerization está para que 1h integre a los AE en la DNA doble-trenzó la estructura, y quita a los AE unchimeric con agua secundaria. Finalmente, en la célula luminescente añada los reactivo de la iniciación de la luminiscencia en orden para detectar la quimioluminescencia generada por los AE chimerized en la DNA. Al detectar el daño de la DNA del timo del becerro por el formaldehído y el acetaldehído, añada el reactivo del daño a la DNA después del chimerization de los AE, y utilícelo después de cierto periodo de tiempo. La segunda agua quita a los AE lanzados después de que se dañe la DNA, y el reactivo de la iniciación de la luminiscencia se añade para detectar la intensidad de la quimioluminescencia de los AE quiméricos en la DNA.

 

Los estudios han mostrado que el éster del acridinium se puede utilizar como indicador de la quimioluminescencia con una buena estructura de intercalar el doble hélice de la DNA. Este método de detección es posible para el daño de la rotura de la DNA y el método de detección de la quimioluminescencia. Tiene las ventajas de la simplicidad y de la sensibilidad. Los estudios del daño proporcionan un método simple de la investigación. Los marcadores luminescentes del éster de la acridina de Desheng tienen las propiedades de la buena estabilidad hidrolítica, de la estabilidad termal y del alto ratio señal/ruido, y las condiciones de etiquetado son suaves, la tarifa de etiquetado es alta, y la separación no afecta a la separación después de etiquetar. , Se considera tan ser marcador químico ideal.