Grado cosmético CAS de la preparación enzimática de la esterasa del colesterol NINGÚN 9026-00-0

La esterasa del colesterol cataliza la hidrólisis de los ésteres del esterol en sus esteroles componentes y ácidos grasos. La enzima se encuentra sobre todo en el páncreas, pero se ha detectado en otros tejidos también. Las sales de bilis, tales como cholate y sus conjugaciones, se requieren para estabilizar la enzima en su forma polimérica nativa y para protegerla contra la hidrólisis proteolítica en el intestino (Vahouny y Treadwell 1968). La esterasa del colesterol encuentra usos clínicos en la determinación del colesterol de suero (Allain y otros 1974).

Historia:

En los 1900s tempranos la síntesis y la hidrólisis enzimático catalizadas de los ésteres del colesterol en presencia de ciertos tejidos fueron observadas y descritas (Kondo 1910, Schultz 1912, Cytronberg 1912, Gardner y el Lander 1913, Mueller 1916, el portero 1916, Nomura 1924, Shope 1928, Nedswedski 1935, Klein 1939, Sperry 1935, y Sperry y Stoyanoff 1937).

En 1949 y 1950, dos papeles fueron publicados como parte de un estudio extenso en la esterasa del colesterol. Esta investigación describió un método para la preparación enzimática cruda que se centró en la importancia de emulsiones estables del colesterol y los ésteres del colesterol para la actividad (Yamamoto y otros 1949, y la inflamación y Treadwell 1950). En los años 50, la esterasa del colesterol del suero y los otros tejidos fueron estudiados (Korzenovsky 1960). En 1957, Hernández y Chaikoff estudiaron las propiedades de la esterasa pancreática del colesterol específicamente e idearon un método turbidimétrico rápido para la valoración enzimática de la actividad (Hernández y Chaikoff 1957).

En los años 60, Vahouny y otros estudió los métodos para proteger la esterasa del colesterol contra la inactivación proteolítica (Vahouny y otros 1964). Este estudio juntado con la correlación sabida entre la enfermedad cardiovascular y el alto colesterol de suero (llaves el an o 80, y Goldstein y Brown 2003) llevó al desarrollo de los métodos totales de la determinación del colesterol de suero usando la esterasa del colesterol (Allain y otros 1974).

En 1989, Kyger y otros ordenó una copia del cDNA de la esterasa pancreática bovina del colesterol. En 1994, el estudio de la señal “4S” mostró que ése que bajaba niveles de LDL con el uso de statins podría prevenir ataques del corazón y prolongar por primera vez vida (Goldstein y Brown 2003). Con tales opciones del tratamiento disponibles y la necesidad de probar el colesterol total en el suero que sube dramáticamente, la esterasa del colesterol tiene convertido de las enzimas más ampliamente utilizadas en los laboratorios clínicos (MacLachlan 2000).

Especificidad:

La esterasa del colesterol se sintetiza en las células acinar del páncreas, se almacena en gránulos del cimógeno, y se secreta como componente del jugo pancreático en el lumen del intestino delgado (Labow y al.1983). La esterasa del colesterol hidroliza una amplia gama de substratos del éster incluyendo los ésteres del colesterilo, los acylglycerides, los fosfolípidos (Brockerhoff y Jensen 1974), los ésteres del retinyl (Fredrikzon y otros 1978), los ésteres de la vitamina, y los ésteres fenilos (Rudd y Brockman 1984). La enzima también se ha encontrado para tener actividad del amidase (Hui y otros 1993). La enzima es útil como biocatalizador debido a su capacidad de catalizar reacciones del transacylation en un ambiente agua-limitado (Gallo y otros 1977, Kazlauskas 1989, y Feaster y otros 1996).

Características moleculares:

El gen que codifica la esterasa del colesterol en los cerdos (lipA) está situado en el cromosoma 14 (identificación del GEN: 100142668). El gen de LIPA se conserva en el ser humano, chimpancé, perro, vaca, ratón, rata, pollo, zebrafish, mosca del vinagre, mosquito, elegans de la C., pombe del S., S. cerevisiae, gossypii del E., grisea del M., cassa del N., thaliana del A., y arroz.

Composición:

La esterasa del colesterol es una glicoproteína que en presencia de los agregados de las sales a un hexamer (Hyun y otros 1971). La esterasa del colesterol pertenece a la familia del doblez de la alfa/de la beta-hidrolasa (Ollis y otros 1992, y a Cygler y otros 1993). La mayoría de los miembros de esta familia son esterasas y características secundarias y terciarias de la parte. Casi todos utilizan un mecanismo catalítico de la esterasa de la serina, que se asemeja al de las proteasas de la serina (Kraut 1977).

Número de adhesión de la proteína: NP_001116606

Peso molecular:

• Monómero: kDa 65 (Hyun y otros 1971)
• Monómero: kDa 43,3 (teórico)
• Hexamer: kDa 400 (Hyun y otros 1971)

PH óptimo:

• Para la esterificación, 6.1-6.2 (Vahouny y Treadwell 1968)
• Para la hidrólisis, 6.6-7.0 (Vahouny y Treadwell 1968)

Punto isoeléctrico:

• 7,91 (teórico)

Coeficiente de extinción:

• 86.680 cm^-1 M^-1 (teórico)
• E_el1%,280 = 20,01 (teórico)

Residuos activos del sitio:

• Serina (S194)
• Histidina (H435)
• Aspartato (D320)

Activadores:

• Sales de bilis
• Cholate (Vahouny y otros 1964)
• Glicocolato (Vahouny y otros 1964)
• Taurocholate (Vahouny y otros 1964)

Inhibidores:

• PMSF y p-cloromercuriobenzoato (Hyun y otros 1971, y Vahouny y otros 1964)
• Fluorophosphate Diisopropyl (Momsen y Brockman 1976)
• Hectogramo²⁺, AG ⁺, y detergentes iónicos
• Carbamatos ariles (Feaster y otros 1996)

Usos:

• Determinación del colesterol en suero y plasma, con la oxidasis del colesterol o la peroxidasa
• Síntesis de alcoholes ópticamente activos y de ácidos carboxílicos (vía la hidrólisis, la esterificación, o el transesterificación del éster)